第二節(jié) 熒光分析法
了解熒光分析法的基本原理和應(yīng)用;熒光光度計(jì)的基本結(jié)構(gòu)。
一、基本原理
熒光的產(chǎn)生：此化學(xué)物質(zhì)能從外界吸收并儲(chǔ)存能量(如光能、化學(xué)能等)而進(jìn)入激發(fā)態(tài)，當(dāng)其從激發(fā)態(tài)再回復(fù)到基態(tài)時(shí)，過(guò)剩的能量可以電磁輻射的形式放射(即發(fā)光)。熒光發(fā)射的特點(diǎn)是：可產(chǎn)生熒光的分子或原子在接受能量后即刻引起發(fā)光;而一旦停止供能，發(fā)光(熒光)現(xiàn)象也隨之在瞬間內(nèi)消失。
發(fā)射熒光的光量子數(shù)亦即熒光強(qiáng)度，除受激發(fā)光強(qiáng)度影響外，也與激發(fā)光的波長(zhǎng)有關(guān)。各個(gè)熒光分子有其特定的吸收光譜和發(fā)射光譜(熒光光譜)，即在某一特定波長(zhǎng)處有最大吸收峰和最大發(fā)射峰。選擇激發(fā)光波長(zhǎng)量接近于熒光分子的最大吸收峰波長(zhǎng)，且測(cè)定光波量接近于最大發(fā)射光波峰時(shí)，得到的熒光強(qiáng)度也最大。
物質(zhì)的激發(fā)光譜和熒光發(fā)射光譜，可以用作該物質(zhì)的定性分析。當(dāng)激發(fā)光強(qiáng)度、波長(zhǎng)、所用溶劑及溫度等條件固定時(shí)，物質(zhì)在一定濃度范圍內(nèi)，其發(fā)射光強(qiáng)度與溶液中該物質(zhì)的濃度成正比關(guān)系，可以用作定量分析。熒光分析法的靈敏度一般較紫外分光光度法或比色法為高，濃度太大的溶液會(huì)有“自熄滅”作用，故熒光分析法應(yīng)在低濃度溶液中進(jìn)行。
二、熒光分光光度計(jì)
激發(fā)光源→激發(fā)光單色器→樣品池
↓
發(fā)射光單色器→檢測(cè)器→數(shù)據(jù)記錄處理
樣品池用低熒光材料制成，四面透光，發(fā)射光方向與激發(fā)光成直角。
三、應(yīng)用：熒光分析可用于鑒別和含量測(cè)定。一般采用對(duì)照品比較法測(cè)定含量，靈敏度高、選擇性好，但干擾多、線(xiàn)性范圍窄，多用于需要高靈敏度和允許較大變異性的樣品分析。
第三節(jié) 紅外分光光度法
熟悉紅外分光光度法的基本原理以及在藥物鑒別、檢查中的應(yīng)用。
了解紅外光譜儀的基本結(jié)構(gòu)。
一、基本原理
紅外光譜是由分子的振動(dòng)、轉(zhuǎn)動(dòng)能極引起的光譜。當(dāng)用一定頻率的紅外光照射某物質(zhì)分子時(shí)，若該物質(zhì)的分子中某基團(tuán)的振動(dòng)頻率與它相同，則此物質(zhì)就能吸收這種紅外光，使分子由振動(dòng)基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)。其條件為：
1即分子振動(dòng)必須伴隨瞬時(shí)偶極矩的變化。
2.紅外輻射光子的能量應(yīng)與分子振動(dòng)能級(jí)躍遷所需的能量相等。
因此，若用不同頻率的紅外光依次通過(guò)測(cè)定分子時(shí)，就會(huì)出現(xiàn)不同強(qiáng)弱的吸收現(xiàn)象。用T%-λ作圖就得到其紅外光吸收光譜醫(yī)學(xué)全.在.線(xiàn).提供. m.gydjdsj.org.cn。紅外光譜具有很高的特征性，每種化合物都具有特征的紅外光譜。用它可進(jìn)行物質(zhì)的結(jié)構(gòu)分析和定量測(cè)定。
二、紅外光譜儀
光源-吸收池-單色器-檢測(cè)器-數(shù)據(jù)記錄和處理
三、應(yīng)用
1鑒別：紅外光譜特征性強(qiáng)，鑒別時(shí)按《藥品紅外光譜集》中收載的制備方法制備，與該品種對(duì)照?qǐng)D譜比較應(yīng)一致。
2.檢查：目前，主要應(yīng)用紅外光譜對(duì)無(wú)效或低效晶型進(jìn)行檢查，依據(jù)藥物與其同質(zhì)異晶雜質(zhì)在特定波數(shù)的吸收有顯著差異
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