豬
痢疾病原分離鑒定
感謝大夫為我快速解答——該如何治療和防治
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1材料與方法:1.1病料來源:2006年4月長春市郊區(qū)某大型養(yǎng)豬場送檢的疑似豬痢疾的病、死幼豬若干頭,已死亡豬只死亡時間未超過12 h。1.2抹片鏡檢:以病豬結腸黏膜刮取物或腸內容物與適量生理鹽水混合后制成壓滴標本片置于暗視野顯微鏡下(400倍)鏡檢。1.3分離培養(yǎng):采用過濾培養(yǎng)法。用滅菌生理鹽水將病
豬大腸黏液做5~10倍稀釋,輕度離心去沉渣,上清先用大孔徑濾膜逐級過濾,濾液再經(jīng)0.45μm濾膜過濾兩次。取濾液直接涂布接種于TSB鮮血瓊脂平板上,同時在培養(yǎng)基中加入壯觀霉素和
萬古霉素各200μg,37℃~38℃嚴格厭氧培養(yǎng)3d,當培養(yǎng)基上出現(xiàn)無菌落的β型溶血區(qū)時,挑取溶血區(qū)內小塊瓊脂另做純培養(yǎng),每隔2d移植1次,共移植3次,對得到的純培養(yǎng)物做鏡檢。1.4致病力鑒定試驗:采用動物感染試驗。購自長春生物制品所的2周齡豚鼠和3周齡昆明系小鼠各20只,各取10只灌服待檢菌的新鮮培養(yǎng)液,菌液濃度為5×108菌/mL,每次灌服1 mL,另外的20只豚鼠和小鼠分別做對照試驗。1.5藥敏試驗:藥敏試紙購自北京天壇藥物生物技術開發(fā)公司。將藥敏試紙放于瓊脂平板上37℃~38℃嚴格厭氧培養(yǎng)48 h,結果判斷依據(jù)《紙片法抗菌藥物敏感試驗操作標準(第四版)》進行。2結果:2.1病豬及病死豬病理剖檢變化:病死豬極度消瘦,被毛為糞便污染。病變主要在結腸和
盲腸,回盲瓣存在明顯分界。急性型病豬的大腸壁和腸系膜充血、
水腫,淋巴濾泡增大,腸黏膜腫脹并附有黏液、血塊和纖維性滲出物。慢性型病豬可見大腸黏膜呈出血性纖維素性炎癥,黏膜表層壞死,形成黏液纖維蛋白性假膜,外觀呈麩皮樣或
豆腐渣樣。其他臟器無明顯變化。組織學觀察可見大腸黏膜層有炎癥反應,在腸腔表面和腺窩內可見到數(shù)量不一的豬痢疾蛇形螺旋體。2.2抹片鏡檢:暗視野顯微鏡下觀察可見大量活菌體,呈蛇樣活潑運動。菌體長約6~8μm,有3~5個疏卷曲,兩端尖銳,形似雙燕翅狀。2.3分離培養(yǎng):被檢樣品在TSB培養(yǎng)基上培養(yǎng)2d后,在培養(yǎng)基上形成扁平、半透明、針尖狀、強β型溶血性菌落,其純培養(yǎng)菌落抹片鏡檢所見結果同2.2。2.4致病力鑒定試驗:灌服菌液3周內,大約一半的豚鼠和小鼠發(fā)生下痢和腸道疾病,而對照組動物未見發(fā)病。2.5藥敏試驗:此次分離的菌株對痢菌凈、丁胺卡那霉素、桿菌肽敏感;對
慶大霉素、
諾氟沙星、
氯霉素、
鏈霉素、
四環(huán)素等稍敏感;對
青霉素、
環(huán)丙沙星、
氨芐西林、土霉素、
紅霉素等幾乎不敏感。3討論近年來,在豬養(yǎng)殖過程中,為了防控一些細菌感染,在飼料添加劑及治療中盲目使用一些抗菌藥物,導致耐藥菌株越來越多并日趨嚴重。發(fā)生該病時,有條件的應根據(jù)藥敏試驗結果,選擇敏感藥物進行治療,且應注意交替用藥,按療程投藥,這樣才能收到較好的治療效果。本病目前尚無疫苗可供預防,藥物治療雖可控制豬群的發(fā)病率、減少死亡,但停藥后極易復發(fā),在豬群中較難根除,只有采取綜合性預防措施并配合藥物防治才能有效地控制或消滅該病。(1)禁止從疫區(qū)引進種豬,必須引進時應進行嚴格檢疫,并至少隔離觀察1個月。(2)對無病豬群應加強飼養(yǎng)管理和清潔衛(wèi)生,實行“全進全出”的育肥制度;發(fā)病豬數(shù)量多、流行面廣且難以全群淘汰時,對豬群采用藥物治療,并結合(
過氧乙酸、新潔爾滅、NaOH溶液等消毒)、隔離、合理處理糞尿等措施,可有效降低豬群的發(fā)病率。
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