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1、胚胎的采集與洗滌利用雙通式或三通式導(dǎo)管沖卵器多次向子宮角注入沖卵液，反復(fù)沖洗回收
桑椹至胚期胚胎。2、加入冷凍液室溫條件下，在加入1.4M/L
甘油的冷凍液中
脫水平衡20min。3、裝管和標(biāo)記將胚胎與冷凍液按前述方法裝入0.25ml細(xì)管中，并在細(xì)管外標(biāo)記供體牛號(hào)、胚胎數(shù)量、等級(jí)、冷凍日期等。4、冷凍和誘發(fā)結(jié)晶（植冰)將裝入細(xì)管的胚胎放入冷凍儀中，在0℃平衡10min，以l℃/min的速度降至-6～-7℃，在此溫度下誘發(fā)結(jié)晶，并平衡10min，然后以O(shè).3℃/min的速度降溫至-35～-38℃，投入液氮保存。5、解凍和脫除保護(hù)劑從液氮中取出裝胚胎的細(xì)管，立即投入37℃水浴中，并輕輕擺動(dòng)，1min后取出即完成解凍過程。然后用O.2～O.5M蔗糖
酪酸鹽緩沖液（PBS)分兩步或一步法脫除冷凍保護(hù)劑使胚胎復(fù)蘇，最后移人PBS培養(yǎng)液中準(zhǔn)備移植。
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