| 公開(公告)號(hào) | CN101139568A |
| 公開(公告)日 | 2008.03.12 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200710035499.X |
| 申請(qǐng)日期 | 2007.08.03 |
| 專利名稱 | 抗癌抗菌基因工程活性肽的生產(chǎn)方法 |
| 主分類號(hào) | C12N1/21(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C12N1/21(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 湖南師范大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 夏立秋;鄒先瓊;丁學(xué)知;張友明;孫運(yùn)軍;黃 璠;莫湘濤 |
| 地址 | 410081湖南省長(zhǎng)沙市岳麓區(qū)麓山路36號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 長(zhǎng)沙星耀專利事務(wù)所 |
| 代理人 | 寧星耀;寧 岡 |
| 國(guó)省代碼 | 湖南;43 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種抗癌抗菌基因工程活性肽的生產(chǎn)方法，其特征在于，包括以下步驟： (1)采用大腸桿菌的偏愛(ài)密碼子將Ap1及Ap2基因密碼子進(jìn)行優(yōu)化； (2)PCR分別合成抗菌肽基因Ap1和Ap2； (3)選用PCR對(duì)表達(dá)載體進(jìn)行改造，構(gòu)建載體pETΔt： (4)將Ap1和Ap2分別克隆進(jìn)pETΔt表達(dá)載體，構(gòu)建抗菌肽Ap1和Ap2的重組質(zhì)粒pETΔt1及pETΔt2； (5)構(gòu)建多順?lè)醋颖磉_(dá)載體pETΔt21，以共表達(dá)抗菌肽Ap1及Ap2； (6)將所述重組質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)入大腸桿菌DH10B，構(gòu)建抗癌抗菌工程菌，實(shí)現(xiàn)抗菌肽的異源表達(dá)； (7)異源表達(dá)抗菌肽Ap1和Ap2的純化。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種抗癌抗菌基因工程活性肽的生產(chǎn)方法，其包括以下步驟：(1)采用大腸桿菌的偏愛(ài)密碼子將Ap1及Ap2基因密碼子進(jìn)行優(yōu)化；(2)PCR分別合成抗菌肽基因Ap1和Ap2；(3)選用PCR對(duì)表達(dá)載體進(jìn)行改造，構(gòu)建載體pETΔt：(4)將Ap1和Ap2分別克隆進(jìn)pETΔt表達(dá)載體，構(gòu)建抗菌肽Ap1和Ap2的重組質(zhì)粒pETΔt1及pETΔt2；(5)構(gòu)建多順?lè)醋颖磉_(dá)載體pETΔt21，以共表達(dá)抗菌肽Ap1及Ap2；(6)將所述述重組質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)入大腸桿菌DH10B；(7)異源表達(dá)抗菌肽Ap1和Ap2的純化。本發(fā)明工藝簡(jiǎn)單，生產(chǎn)成本低，所得產(chǎn)品抗癌抑菌活性高。 |
| 國(guó)際公布 |
