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一種雙啟動(dòng)子調(diào)控腺病毒蛋白的方法及用途

公開(公告)號(hào) CN101130779A  
公開(公告)日 2008.02.27  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200710070109.2  
申請(qǐng)日期 2007.07.20  
專利名稱 一種雙啟動(dòng)子調(diào)控腺病毒蛋白的方法及用途  
主分類號(hào) C12N15/66(2006.01)I  
分類號(hào) C12N15/66(2006.01)I;C12N15/861(2006.01)I;C12N15/53(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 浙江大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 滕理送;毛晨宇;王浩浩;華漢巨;曹 江  
地址 310027浙江省杭州市西湖區(qū)浙大路38號(hào)  
頒證日  
國際申請(qǐng)  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 杭州求是專利事務(wù)所有限公司  
代理人 張法高;趙杭麗  
國省代碼 浙江;33  
主權(quán)項(xiàng) 一種用雙啟動(dòng)子調(diào)控腺病毒蛋白的方法,其特征是:雙啟動(dòng)子是人端粒酶催化亞單位啟動(dòng)子和環(huán)氧化酶2啟動(dòng)子,(1)是用Age I單酶切,利用連接反應(yīng)把人端粒酶催化亞單位啟動(dòng)子插入到腺病毒載體pXC1的E1A前啟動(dòng)子區(qū)域,(2)用Eag I單酶切,利用連接反應(yīng)把環(huán)氧化酶2啟動(dòng)子插入到腺病毒載體pXC1的E1B前啟動(dòng)子區(qū)域,(3)把人端粒酶催化亞單位啟動(dòng)子和環(huán)氧化酶2啟動(dòng)子同時(shí)插入到一個(gè)腺病毒pXC1載體上,分別調(diào)控腺病毒早期基因E1A和E1B,所述人端粒酶催化亞單位啟動(dòng)子具有SEQ ID NO.7的核苷酸序列,所述環(huán)氧化酶2啟動(dòng)子具有SEQ ID NO.8的核苷酸序列。  
摘要 本發(fā)明提供一種用雙啟動(dòng)子調(diào)控腺病毒蛋白的方法,是利用人端粒酶催化亞單位啟動(dòng)子和環(huán)氧化酶2啟動(dòng)子,用Age I單酶切和EagI單酶切,分別插入到腺病毒載體pXC1的E1A和E1B前啟動(dòng)子區(qū)域,然后再同時(shí)插入到一個(gè)腺病毒pXC1載體上,分別調(diào)控腺病毒早期基因E1A和E1B。本發(fā)明的方法可在制備調(diào)控腺病毒早期基因E1A和E1B的腫瘤基因藥物中應(yīng)用。本發(fā)明方法設(shè)計(jì)合理,實(shí)驗(yàn)證明,這種重組腺病毒能選擇性地在表達(dá)端粒酶和環(huán)氧化酶2的腫瘤細(xì)胞內(nèi)增殖并殺傷腫瘤細(xì)胞,而在正常細(xì)胞內(nèi)不增殖。  
國際公布  
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