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抗傳染性法氏囊病病毒VP4蛋白單克隆抗體

公開(公告)號 CN101121748A  
公開(公告)日 2008.02.13  
申請(專利)號 CN200710070131.7  
申請日期 2007.07.20  
專利名稱 抗傳染性法氏囊病病毒VP4蛋白單克隆抗體  
主分類號 C07K16/08(2006.01)I  
分類號 C07K16/08(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 浙江大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 周繼勇;王永志;郭軍慶  
地址 310029浙江省杭州市江干區(qū)凱旋路268號浙江大學(xué)華家池校區(qū)動物科學(xué)學(xué)院  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 杭州中成專利事務(wù)所有限公司  
代理人 馮子玲  
國省代碼 浙江;33  
主權(quán)項(xiàng) 一種抗傳染性法氏囊病病毒(IBDV)VP4蛋白單克隆抗體,其特征在于:該單克隆抗體是用純化的IBDV VP4重組蛋白為抗原,通過雜交瘤細(xì)胞方法獲得的,特異識別IBDV感染細(xì)胞中的VP4病毒蛋白的單克隆抗體。  
摘要 本發(fā)明抗傳染性法氏囊病病毒(IBDV)VP4蛋白單克隆抗體屬于生物技術(shù)領(lǐng)域,涉及基因工程。將IBDV VP4基因克隆于原核表達(dá)載體pET-28a,在大腸桿菌BL21(DE3)中誘導(dǎo)表達(dá);分離包涵體,用8M尿素溶解,經(jīng)鎳螯合親和層析純化獲得VP4重組蛋白。用VP4重組蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞SP2/0進(jìn)行細(xì)胞融合,以HAT培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)后,以VP4重組蛋白和IBDV感染細(xì)胞進(jìn)行雙重ELISA篩選和有限稀釋法克隆化,獲得分泌抗IBDV VP4蛋白單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株,其中4C3、6A4和6H8腹水的ELISA效價(jià)分別為:6.4×105、2.6×106和5.2×106,均能特異識別IBDV感染細(xì)胞的病毒蛋白,其Ig亞型重鏈為IgG1,輕鏈為κ。  
國際公布  
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