公開(公告)號
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CN101096654A
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公開(公告)日
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2008.01.02
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申請(專利)號
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CN200710041123.X
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申請日期
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2007.05.24
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專利名稱
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以GST-hDSL重組蛋白增殖人造血干細胞及祖細胞的方法
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主分類號
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C12N5/08(2006.01)I
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分類號
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C12N5/08(2006.01)I;A61K38/16(2006.01)N
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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上海交通大學
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發(fā)明(設(shè)計)人
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韓 偉;吳明媛;林小娟;姜俊芬
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地址
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200240上海市閔行區(qū)東川路800號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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上海交達專利事務所
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代理人
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王錫麟;王桂忠
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國省代碼
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上海;31
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主權(quán)項
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一種以GST-hDSL重組蛋白增殖人造血干細胞及祖細胞的方法,其特征在于,具體步驟包括: (1)從髓、外周血或臍帶血中取樣,用密度梯度離心分離出單核細胞,然后用CD34分離試劑盒對CD34細胞進行標記,采用免疫磁珠技術(shù)對CD34細胞進行純化,得到CD34+細胞; (2)采用含10%-20%胎牛或人血清的細胞培養(yǎng)基對上述CD34+細胞進行培養(yǎng),加入細胞因子,加入蛋白,培養(yǎng)1周,換入細胞培養(yǎng)基,并重新加入蛋白再繼續(xù)培養(yǎng)擴增1周,得到增殖了的造血干細胞、祖細胞。
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摘要
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本發(fā)明是一種生物工程技術(shù)領(lǐng)域的以GST-hDSL重組蛋白增殖人造血干細胞及祖細胞的方法。步驟包括:(1)從骨髓、外周血或臍帶血中,用密度梯度離心法分離制備單個核細胞,然后對CD34細胞進行標記,而后對其進行純化,得到CD34+細胞;(2)將CD34+細胞加入細胞培養(yǎng)基中進行培養(yǎng),同時加入細胞因子和GST-hDSL重組蛋白,培養(yǎng)后,換入新鮮的細胞培養(yǎng)基并重新加入細胞因子和GST-hDSL重組蛋白再繼續(xù)培養(yǎng),得到增殖了的造血干、祖細胞。從CD34+細胞和從總集落數(shù)及高增殖潛能集落數(shù)來檢測,本發(fā)明可有效促進人造血干、祖細胞的增殖,并將在生物醫(yī)藥領(lǐng)域得到廣泛的應用。
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國際公布
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