| 公開(公告)號 | CN100357316C |
| 公開(公告)日 | 2007.12.26 |
| 申請(專利)號 | CN200410041095.8 |
| 申請日期 | 2004.06.23 |
| 專利名稱 | 人類細胞中體的蛋白質復合物的分離方法 |
| 主分類號 | C07K1/30(2006.01)I |
| 分類號 | C07K1/30(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 中國科學技術大學 |
| 發(fā)明(設計)人 | 姚雪彪;符傳孩;繆 勇;薛 宇 |
| 地址 | 230026安徽省合肥市金寨路96號中國科學技術大學專利辦公室 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 安徽合肥華信知識產權代理有限公司 |
| 代理人 | 余成俊 |
| 國省代碼 | 安徽;34 |
| 主權項 | 人類細胞中體的蛋白質復合物的分離方法，包括將人體細胞培養(yǎng)同步化及收集、加入低滲液重懸并孵育使收集細胞膨脹、破碎重懸的膨脹細胞后取出上清、通過密度梯度進行離心分離并利用去污劑抽提純化得到中體蛋白質復合物、分離鑒定中體蛋白種類，其特征在于，所述人體細胞培養(yǎng)同步化及收集過程中，所述同步化培養(yǎng)、收集的細胞是有絲分裂末期的人體細胞，其步驟為：(1)使細胞同步于G1/S期；(2)使細胞同步通過S期；(3)使細胞同步在有絲分裂前中期；(4)使細胞高度同步在有絲分裂末期；(5)用常規(guī)方法收集處于有絲分裂末期的細胞。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及涉及人體細胞分離技術。所述的人類細胞中體的蛋白質復合物，它至少由129種蛋白組成，其中有30種細胞骨架蛋白、4種中心體蛋白、6種囊泡轉運相關蛋白、6種染色體調節(jié)蛋白、2種馬達蛋白、3種檢測點蛋白、7種降解調控蛋白、9種膜蛋白、12種轉錄與翻譯相關蛋白、28種蛋白激酶、5種線粒體蛋白、9種分子伴侶蛋白和7種未知類蛋白。在分離方法中，包括將人體細胞培養(yǎng)同步化及收集、加入低滲液重懸并孵育使收集細胞膨脹、破碎重懸的膨脹細胞后取出上清、通過密度梯度進行離心分離并利用去污劑抽提純化蛋白質復合物、分離鑒定中體蛋白種類。人類細胞中體的蛋白質復合物組成的揭示為篩選抗腫瘤藥物提供了模式系統(tǒng)和靶標蛋白ezrin及靶位。 |
| 國際公布 |
