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一種嗜熱耐高溫葡聚糖磷酸化酶及其制備方法與應(yīng)用

公開(公告)號 CN101045931A  
公開(公告)日 2007.10.03  
申請(專利)號 CN200710013367.7  
申請日期 2007.03.12  
專利名稱 一種嗜熱耐高溫葡聚糖磷酸化酶及其制備方法與應(yīng)用  
主分類號 C12N15/54(2006.01)I  
分類號 C12N15/54(2006.01)I;C12N9/12(2006.01)I;C12P19/02(2006.01)I;C12P19/12(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 山東大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計)人 申玉龍;洪 燁  
地址 250100山東省濟南市歷下區(qū)山大南路27號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 濟南金迪知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司  
代理人 許德山  
國省代碼 山東;37  
主權(quán)項 一種葡聚糖磷酸化酶,其特征在于,具有DNA序列如下: atgcggaaacacttaaaaggtaaagctcataagaaattacacatgataatcagtatcact60 gcggagttaggaattgactttggtgagaactttgcaggtggtttaggcgttctcgaagga120 gataagttttatgcctcagcaagattaggaattgattacactgtctttacattattttat180 agaaaaggatatactggaaatgaggagaaacagaaagaattgcttaaaaatcttgttaaa240 gaatgggagactgaaatagaacttaaaaagggtaaaataaagatcgaatacttaacgtat300 aaacttaatactgcaaaagctatatttattaacattttatcaccagattgggctaaaaga360 cttaacgagaaactttacattgagaattctgaagaagatagattttacaaatatttagtc420 cttgctaaagcaactgagaaatacattagtgagaagataggttgggataagataaaatat480 gttgacttgcaagaagcctatccgtctttcttaccattattaaaatattttcctagatac540 agaataataatacacacaccagcaccgtggggtcatcccacatttcctgcaagatatttc600 aaagaagaatttggctttgaatttccctttgatccagttgttatgactgaaataggatta660 tcttcagccgtgcaaggaatagtagtctcaaaaaagatgcttcatcacgtaagcaaaaca720 tttccacatcatatgcataaaataaaggctataacgaatgctgttgaaatacccagatgg780 agacatccattattaaataacgtcaaagatcttgatgattttatcaagaagaaaaaagaa840 gtgaaaaaagagagtttaaagaaactaggaaaggagagtgataaacccacaataggctgg900 gtaaggagaataactcaatataaaagaccagaattcatattaagattaattgacgaatta960 agggatgatgtcgtttttataattggtggaaaggctcatccatatgagtattatggtgta1020 gaattagagaaaaagtttaaggaatatgctcaaaaaagaaataatgtaatttacgttcag1080 ggggtggatatacagcaaatgaaattagcaatatggtctagtgacatatggacctttaca1140 ccttattctggatgggaggctagtggaacaagttttatgaaggctggagtgaatggagtt1200 ccttctgtagcatcaagagacggtgccgtaccagagattattaaggatggatataatggt1260 tggctttatggagaagatagatacgagcttctaccagtagacacatatgatagggaatat1320 gaggaattcgcaagaaaggtgaaggaggctttaaacaagtattatgaagttggctataat1380 gcttatcatactttttccgatttttgttctatggatagacttatgaaagaatacgcttta1440 taa1443。  
摘要 一種嗜熱耐高溫的葡聚糖磷酸化酶及其制備方法與應(yīng)用,屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域。該酶的最適酶活溫度為75℃,具有較為寬的酶適應(yīng)溫度,在70℃以上具有很高的酶活;該酶的最適酶活pH為6.0。該酶具有獨特的底物特異性,其降解方向和合成方向所需的最小糖鏈長度分別為三糖和二糖,均比普通的葡聚糖磷酸化酶少一個糖基以上。該酶的制備方法,包括質(zhì)粒、菌株與培養(yǎng)基的選擇,PCR擴增及重組質(zhì)粒的構(gòu)建,基因的誘導(dǎo)表達與蛋白質(zhì)的純化。該酶具有極高的熱穩(wěn)定性,可用于醫(yī)藥、食品、生物工程領(lǐng)域1-磷酸葡萄糖及寡糖的制備。  
國際公布  
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