公開(公告)號
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CN101045931A
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公開(公告)日
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2007.10.03
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申請(專利)號
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CN200710013367.7
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申請日期
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2007.03.12
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專利名稱
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一種嗜熱耐高溫葡聚糖磷酸化酶及其制備方法與應(yīng)用
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主分類號
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C12N15/54(2006.01)I
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分類號
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C12N15/54(2006.01)I;C12N9/12(2006.01)I;C12P19/02(2006.01)I;C12P19/12(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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山東大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計)人
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申玉龍;洪 燁
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地址
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250100山東省濟南市歷下區(qū)山大南路27號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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濟南金迪知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
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代理人
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許德山
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國省代碼
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山東;37
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主權(quán)項
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一種葡聚糖磷酸化酶,其特征在于,具有DNA序列如下: atgcggaaacacttaaaaggtaaagctcataagaaattacacatgataatcagtatcact60 gcggagttaggaattgactttggtgagaactttgcaggtggtttaggcgttctcgaagga120 gataagttttatgcctcagcaagattaggaattgattacactgtctttacattattttat180 agaaaaggatatactggaaatgaggagaaacagaaagaattgcttaaaaatcttgttaaa240 gaatgggagactgaaatagaacttaaaaagggtaaaataaagatcgaatacttaacgtat300 aaacttaatactgcaaaagctatatttattaacattttatcaccagattgggctaaaaga360 cttaacgagaaactttacattgagaattctgaagaagatagattttacaaatatttagtc420 cttgctaaagcaactgagaaatacattagtgagaagataggttgggataagataaaatat480 gttgacttgcaagaagcctatccgtctttcttaccattattaaaatattttcctagatac540 agaataataatacacacaccagcaccgtggggtcatcccacatttcctgcaagatatttc600 aaagaagaatttggctttgaatttccctttgatccagttgttatgactgaaataggatta660 tcttcagccgtgcaaggaatagtagtctcaaaaaagatgcttcatcacgtaagcaaaaca720 tttccacatcatatgcataaaataaaggctataacgaatgctgttgaaatacccagatgg780 agacatccattattaaataacgtcaaagatcttgatgattttatcaagaagaaaaaagaa840 gtgaaaaaagagagtttaaagaaactaggaaaggagagtgataaacccacaataggctgg900 gtaaggagaataactcaatataaaagaccagaattcatattaagattaattgacgaatta960 agggatgatgtcgtttttataattggtggaaaggctcatccatatgagtattatggtgta1020 gaattagagaaaaagtttaaggaatatgctcaaaaaagaaataatgtaatttacgttcag1080 ggggtggatatacagcaaatgaaattagcaatatggtctagtgacatatggacctttaca1140 ccttattctggatgggaggctagtggaacaagttttatgaaggctggagtgaatggagtt1200 ccttctgtagcatcaagagacggtgccgtaccagagattattaaggatggatataatggt1260 tggctttatggagaagatagatacgagcttctaccagtagacacatatgatagggaatat1320 gaggaattcgcaagaaaggtgaaggaggctttaaacaagtattatgaagttggctataat1380 gcttatcatactttttccgatttttgttctatggatagacttatgaaagaatacgcttta1440 taa1443。
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摘要
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一種嗜熱耐高溫的葡聚糖磷酸化酶及其制備方法與應(yīng)用,屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域。該酶的最適酶活溫度為75℃,具有較為寬的酶適應(yīng)溫度,在70℃以上具有很高的酶活;該酶的最適酶活pH為6.0。該酶具有獨特的底物特異性,其降解方向和合成方向所需的最小糖鏈長度分別為三糖和二糖,均比普通的葡聚糖磷酸化酶少一個糖基以上。該酶的制備方法,包括質(zhì)粒、菌株與培養(yǎng)基的選擇,PCR擴增及重組質(zhì)粒的構(gòu)建,基因的誘導(dǎo)表達與蛋白質(zhì)的純化。該酶具有極高的熱穩(wěn)定性,可用于醫(yī)藥、食品、生物工程領(lǐng)域1-磷酸葡萄糖及寡糖的制備。
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國際公布
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