| 公開(公告)號(hào) | CN1325638C |
| 公開(公告)日 | 2007.07.11 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200410075550.6 |
| 申請(qǐng)日期 | 2004.12.21 |
| 專利名稱 | 高表達(dá)HBsAg的乙型病毒性肝炎小鼠模型的制備方法 |
| 主分類號(hào) | C12N5/10(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C12N5/10(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;C12N15/52(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 山東大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 孫汶生;劉玉剛;張 秋;高立芬;石永玉;劉素俠;朱法良;郭 春 |
| 地址 | 250061山東省濟(jì)南市經(jīng)十路73號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 濟(jì)南圣達(dá)專利商標(biāo)事務(wù)所 |
| 代理人 | 鄭華清 |
| 國(guó)省代碼 | 山東;37 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種高表達(dá)HBsAg的乙型病毒性肝炎小鼠模型的制備方法，由以下步驟組成： (1)載體構(gòu)建：載體pcDNA3經(jīng)EcoR V線性化后用牛小腸堿性磷酸酶使其去磷酸化，重組克隆載體p3.6II經(jīng)Pvu II酶切后獲得1.1倍的HBV DNA，以T4 DNA連接酶連接1.1倍HBV DNA片段和線性化的pcDNA3；轉(zhuǎn)化大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞DH5α，經(jīng)抗性篩選、酶切、測(cè)序鑒定重組質(zhì)粒pcDNA3-HBV1.1； (2)將含有1.1倍HBV DNA的重組載體pcDNA3-HBV1.1利用尾靜脈高壓注射的方法導(dǎo)入動(dòng)物體內(nèi)，建立高表達(dá)HBsAg的乙型病毒性肝炎小鼠模型； (3)模型鑒定。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種高表達(dá)HBsAg的乙型病毒性肝炎小鼠模型的制備方法，由以下步驟組成：(1)載體構(gòu)建：載體pcDNA3經(jīng)EcoR V線性化后用牛小腸堿性磷酸酶使其去磷酸化，重組克隆載體p3.6II經(jīng)Pvu II酶切后獲得1.1倍的HBV基因片段，以T4 DNA連接酶連接1.1倍HBV DNA片段和線性化的pcDNA3；轉(zhuǎn)化大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞DH5α，經(jīng)抗性篩選、酶切、測(cè)序鑒定重組質(zhì)粒；(2)將含有1.1倍HBV DNA的重組載體利用尾靜脈高壓注射的方法導(dǎo)入動(dòng)物體內(nèi)，建立高表達(dá)HBsAg的乙型病毒性肝炎小鼠模型；(3)模型鑒定。本發(fā)明的方法制作過(guò)程簡(jiǎn)單易行，能廣泛推廣應(yīng)用；制作過(guò)程時(shí)間短，對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的損傷小，動(dòng)物死亡率低；獲得的模型能高水平的表達(dá)HBsAg，亦能較高水平的表達(dá)HBeAg。模型可作為乙肝治療藥物的篩選平臺(tái)，用于HBV感染的基礎(chǔ)研究和臨床相關(guān)研究。 |
| 國(guó)際公布 |
