公開(公告)號
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CN1800365A
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公開(公告)日
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2006.07.12
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申請(專利)號
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CN200510048269.8
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申請日期
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2005.12.31
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專利名稱
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有效提高西洋參懸浮細(xì)胞產(chǎn)量的生產(chǎn)工藝
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主分類號
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C12N5/04(2006.01)I
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分類號
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C12N5/04(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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河北省生物研究所
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發(fā)明(設(shè)計)人
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閆靜輝;李書生;張小兵;李亞璞;李春生;吳 萌;陳英珠;程 華;韓廣彥;籍寶霞;陳瑞芹;辛春艷
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地址
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050081河北省石家莊市友誼南大街46號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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石家莊新世紀(jì)專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司
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代理人
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董金國
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國省代碼
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河北;13
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主權(quán)項
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一種有效提高西洋參懸浮細(xì)胞產(chǎn)量的生產(chǎn)工藝,其特征在于采用以下步驟:(1)配制儲備液;(2)配制培養(yǎng)液:在已配制好的儲備液中加入去離子水稀釋18-22倍,再依次加入白糖、水解乳蛋白、2,4-二氯苯氧乙酸、α-萘乙酸、激動素和吲哚丁酸,,終濃度分別為1.5%-6%、0.3%-1%、0.5-1.5mg/L、0-0.5mg/L、0.2-1.0mg/L和0.2-1.0mg/L,然后調(diào)節(jié)pH值為5.5-6.5,充分?jǐn)嚢韬笱b瓶,100ml-500ml三角瓶,裝液量為三角瓶容積的1/5-1/2。(3)培養(yǎng)液滅菌:密封瓶口,將溫度控制在115-122℃,壓力控制在1.0-1.2kg/cm2,滅菌20-30分鐘,培養(yǎng)液冷卻后備用。(4)接種、培養(yǎng):制成的培養(yǎng)液中,在無菌條件下接入西洋參對數(shù)生長期的懸浮細(xì)胞,每升培養(yǎng)液接入15-50克鮮重的懸浮細(xì)胞,放入搖床中懸浮暗培養(yǎng),接種后2-6天收集懸浮細(xì)胞,重新接種到新培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng),每升培養(yǎng)液中接入15-50克鮮重的懸浮細(xì)胞,10-15天后補充培養(yǎng)液,補充量為培養(yǎng)體積的10%-30%,再培養(yǎng)5-10天,收獲細(xì)胞,提取西洋參人參皂甙。
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摘要
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本發(fā)明涉及一種提高西洋參懸浮細(xì)胞生長量的簡易生產(chǎn)工藝,該工藝包括以下步驟:配制儲備液,裝瓶,滅菌,制成液體培養(yǎng)基,在無菌條件下接入西洋參對數(shù)生長期的懸浮細(xì)胞,放入搖床中懸浮暗培養(yǎng),接種后2-6天,收集懸浮細(xì)胞,10-15天后補料,再培養(yǎng)5-10天,收獲細(xì)胞,提取西洋參人參皂甙,利用該工藝,可使細(xì)胞生長量增長近20倍,比對照提高1-3倍,懸浮細(xì)胞的生長量可達(dá)500-850g/L。
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國際公布
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