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重組人二連體干細(xì)胞因子及其制備

公開(公告)號(hào) CN1435426A  
公開(公告)日 2003.08.13  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN03112934.X  
申請(qǐng)日期 2003.03.10  
專利名稱 重組人二連體干細(xì)胞因子及其制備  
主分類號(hào) C07H21/04  
分類號(hào) C07H21/04;C12N15/62;C12N15/85;C12P21/00  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 南京大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 秦浚川;韓俊海;臧宇輝;朱潔  
地址 210093江蘇省南京市漢口路22號(hào)  
頒證日  
國際申請(qǐng)  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 南京知識(shí)律師事務(wù)所  
代理人 胡錫瑜  
國省代碼 江蘇;32  
主權(quán)項(xiàng) 一種重組人二連體干細(xì)胞因子(rhdSCF)融合蛋白基因。其特征是重組人二連體干細(xì)胞因子(rhdSCF)融合蛋白基因的核苷酸序列和基酸序列為:GAA GGG ATC TGC AGG AAT CGT GTG ACT AAT AAT GTA AAA GAC GTC ACT AAA TTG GTG GCA 60Glu Gly Ile Cys Arg Asn Arg Val Thr Asn Asn Val Lys Asp Val Thr Lys Leu Val Ala 20AAT CTT CCA AAA GAC TAC ATG ATA ACC CTC AAA TAT GTC CCC GGG ATG GAT GTT TTG CCA 120Asn Leu Pro Lys Asp Tyr Met Ile Thr Leu Lys Tyr Val Pro Gly Met Asp Val Leu Pro 40AGT CAT TGT TGG ATA AGC GAG ATG GTA GTA CAA TTG TCA GAC AGC TTG ACT GAT CTT CTG 180Ser His Cys Trp Ile Ser Glu Met Val Val Gln Leu Ser Asp Ser Leu Thr Asp Leu Leu 60GAC AAG TTT TCA AAT ATT TCT GAA GGC TTG AGT AAT TAT TCC ATC ATA GAC AAA CTT GTG 240Asp Lys Phe Ser Asn Ile Ser Glu Gly Leu Ser Asn Tyr Ser Ile Ile Asp Lys Leu Val 80AAT ATA GTG GAT GAC CTT GTG GAG TGC GTG AAA GAA AAC TCA TCT AAG GAT CTA AAA AAA 300Asn Ile Val Asp Asp Leu Val Glu Cys Val Lys Glu Asn Ser Ser Lys Asp Leu Lys Lys 100TCA TTC AAG AGC CCA GAA CCC AGG CTC TTT ACT CCT GAA GAA TTC TTT AGA ATT TTT AAT 360Ser Phe Lys Ser Pro Glu Pro Arg Leu Phe Thr Pro Glu Glu Phe Phe Arg Ile Phe Asn 120AGA TCC ATT GAT GCC TTC AAG GAC TTT GTA GTG GCA TCT GAA ACT AGT GAT TGT GTG GTT 420Arg Ser Ile Asp Ala Phe Lys Asp Phe Val Val Ala Ser Glu Thr Ser Asp Cys Val Val 140TCT TCA ACA TTA AGT CCT GAG AAA GAT TCC AGA GTC AGT GTC ACA AAA CCA TTT ATG TTA 480Ser Ser Thr Leu Ser Pro Glu Lys Asp Ser Arg Val Ser Val Thr Lys Pro Phe Met Leu 160TGC AGG AAT CGT GTG ACT AAT AAT GTA AAA GAC GTC ACT AAA TTG GTG GCA AAT CTT CCA 600Cys Arg Asn Arg Val Thr Asn Asn Val Lys Asp Val Thr Lys Leu Val Ala Asn Leu Pro 200AAA GAC TAC ATG ATA ACC CTC AAA TAT GTC CCC GGG ATG GAT GTT TTG CCA AGT CAT TGT 660Lys Asp Tyr Met Ile Thr Leu Lys Tyr Val Pro Gly Met Asp Val Leu Pro Ser His Cys 220TGG ATA AGC GAG ATG GTA GTA CAA TTG TCA GAC AGC TTG ACT GAT CTT CTG GAC AAG TTT 720Trp Ile Ser Glu Met Val Val Gln Leu Ser Asp Ser Leu Thr Asp Leu Leu Asp Lys Phe 240TCA AAT ATT TCT GAA GGC TTG AGT AAT TAT TCC ATC ATA GAC AAA CTT GTG AAT ATA GTG 780Ser Asn Ile Ser Glu Gly Leu Ser Asn Tyr Ser Ile Ile Asp Lys Leu Val Asn Ile Val 260GAT GAC CTT GTG GAG TGC GTG AAA GAA AAC TCA TCT AAG GAT CTA AAA AAA TCA TTC AAG 840Asp Asp Leu Val Glu Cys Val Lys Glu Asn Ser Ser Lys Asp Leu Lys Lys Ser Phe Lys 280AGC CCA GAA CCC AGG CTC TTT ACT CCT GAA GAA TTC TTT AGA ATT TTT AAT AGA TCC ATT 900Ser Pro Glu Pro Arg Leu Phe Thr Pro Glu Glu Phe Phe Arg Ile Phe Asn Arg Ser Ile 300GAT GCC TTC AAG GAC TTT GTA GTG GCA TCT GAA ACT AGT GAT TGT GTG GTT TCT TCA ACA 960Asp Ala Phe Lys Asp Phe Val Val Ala Ser Glu Thr Ser Asp Cys Val Val Ser Ser Thr 320TTA AGT TAG TAALeu Ser  
摘要 本發(fā)明屬于生物技術(shù)中的基因工程制備多肽藥物技術(shù)領(lǐng)域。其目的是構(gòu)建一種新型融合型二連體干細(xì)胞因子基因,并在昆蟲細(xì)胞中高效分泌表達(dá)和制備生物活性更高副作用更小的重組人二連體干細(xì)胞因子(rhdSCF)。rhdSCF基因?yàn)橐来魏腥薙CF第1-165位氨基酸密碼子,12個(gè)氨基酸連接肽和人SCF第1-145位密碼子及終止密碼的DNA片段。從Sf9細(xì)胞貼壁或懸浮培養(yǎng)液中制備的rhdSCF精品比活為2.8-2.9×106單位/毫克。比E.coli生產(chǎn)的單體rhSCF精品比活高約6倍。它可用于放療、化療及骨髓移植后病人促進(jìn)造血功能和免疫功能的重建和恢復(fù),也可用于干細(xì)胞的體外擴(kuò)增研究。  
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