| 公開(公告)號(hào) | CN1154733C |
| 公開(公告)日 | 2004.06.23 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN97115392.2 |
| 申請(qǐng)日期 | 1997.08.05 |
| 專利名稱 | 改進(jìn)的熱穩(wěn)定DNA聚合酶 |
| 主分類號(hào) | C12N15/52 |
| 分類號(hào) | C12N15/52;C12N9/00;C12Q1/25;C12Q1/68 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | 1996.8.6 US 023376 |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 霍夫曼－拉羅奇有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 戴維·H·蓋爾芬德;莉薩·V·卡爾曼 |
| 地址 | 瑞士巴塞爾 |
| 頒證日 | 2004.06.23 |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 北京市柳沈律師事務(wù)所 |
| 代理人 | 黃益芬 |
| 國(guó)省代碼 | 瑞士;CH |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種重組熱穩(wěn)定DNA聚合酶，其特征在于該聚合酶是天然產(chǎn)生的熱穩(wěn)定DNA聚合酶的突變體形式，其中所述天然產(chǎn)生的熱穩(wěn)定DNA聚合酶含有序列2所示的氨基酸序列基序SerGlnIleGluLeuArgXaa，其中這一序列基序中第7位的“Xaa”是纈氨酸殘基Val或異亮氨酸殘基Ile；其中所述突變體形式在所述序列基序的第4位包含除谷氨酸殘基Glu以外的氨基酸；并且其中所述突變體形式與所述天然產(chǎn)生的熱穩(wěn)定DNA聚合酶相比，表現(xiàn)出對(duì)摻入的非常規(guī)核苷酸的識(shí)別排斥減少。 |
| 摘要 | 本發(fā)明提供了熱穩(wěn)定DNA聚合酶，其含有氨基酸序列Ser Gln Ile XaaLeu Arg Xaa(序列1)，其中該序列的第4位的“Xaa”是任意氨基酸殘基，但不是谷氨酸殘基(Glu)，優(yōu)選為甘氨酸殘基，該序列第7位的“Xaa”是一種纈氨酸殘基(Val)或一種異亮氨酸(Ile)。本發(fā)明還提供了可編碼所述聚合酶的核酸、含有上述核酸的載體和宿主細(xì)胞、以及用于DNA測(cè)序反應(yīng)的組合物、包括上述聚合酶在內(nèi)的試劑盒和測(cè)序方法。 |
| 國(guó)際公布 |
