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重組桿狀病毒及其構(gòu)建方法,以及含該病毒的殺蟲組合物

公開(公告)號 CN1161458C  
公開(公告)日 2004.08.11  
申請(專利)號 CN98814018.7  
申請日期 1998.10.28  
專利名稱 重組桿狀病毒及其構(gòu)建方法,以及含該病毒的殺蟲組合物  
主分類號 C12N7/01  
分類號 C12N7/01;C12N15/33;C12N15/32;C12N15/62;A61K39/12  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 1998.4.3 KR 1998/11914  
申請(專利權(quán))人 諸連鎬;東部韓農(nóng)株式會社  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 錫權(quán);諸連鎬;陳炳來;樸鉉宇;盧鐘烈  
地址 韓國京畿道  
頒證日 2004.08.11  
國際申請 PCT/KR1998/000338 1998.10.28  
進(jìn)入國家日期 2000.11.06  
專利代理機(jī)構(gòu) 上海專利商標(biāo)事務(wù)所  
代理人 徐迅  
國省代碼 韓國;KR  
主權(quán)項(xiàng) 一種重組桿狀病毒,其特征在于,該病毒含有兩個獨(dú)立轉(zhuǎn)錄單元:(a)一個轉(zhuǎn)錄單元,含有編碼與啟動子連接的桿狀病毒多角體蛋白的核苷酸序列;(b)一個轉(zhuǎn)錄單元,含有編碼與多角體蛋白啟動子連接的融合蛋白的核苷酸序列,所述融合蛋白中桿狀病毒多角體蛋白、蘇云金芽孢桿菌晶體蛋白和多管水母Aequorea victoria綠色熒光蛋白依次從N-末端到C-末端連接;其中該桿狀病毒產(chǎn)生重組多角體,所述重組多角體由桿狀病毒多角體蛋白、蘇云金芽孢桿菌晶體蛋白和多管水母Aequorea victoria綠色熒光蛋白組成。  
摘要 一種重組桿狀病毒,它產(chǎn)生一種由桿狀病毒多角體蛋白(PH)、蘇云金芽胞桿菌晶體蛋白(CP)和多管水母aequorea victoria綠色熒光蛋白(GFP)構(gòu)成的重組多角體,該病毒的構(gòu)建通過:將攜帶編碼融合蛋白(其中PH、CP和GFP依次直接從N-末端到C-末端相連)的融合基因的轉(zhuǎn)移載體和野生型桿狀病毒同時引入昆蟲細(xì)胞,并培育該細(xì)胞。該桿狀病毒轉(zhuǎn)移載體pColorBtrus通過下列步驟構(gòu)建:用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)合成來自質(zhì)粒pGFP的編碼GFP的DNA片段、來自野生型苜蓿銀紋夜蛾核型多角體病毒的PH基因、以及來自攜帶有蘇云金芽胞桿菌CrylAc基因的質(zhì)粒pPN6.6的CrylAc基因;首先將編碼GFP的DNA片段和PH基因,以編碼GFP的DNA片段的5’末端和PH基因的3’末端連接的方式,插入桿狀病毒表達(dá)載體pAcUW31,以及然后將CrylAc基因插入PH基因和編碼GFP的DNA片段之間。重組病毒能高致病性的在短時間內(nèi)殺死有害昆蟲并且配備一種監(jiān)測被感染昆蟲的裝置,從而能防止過度使用。  
國際公布 WO1999/051721 英 1999.10.14  
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