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公開(公告)號
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CN1544467A
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公開(公告)日
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2004.11.10
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申請(專利)號
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CN200310105920.1
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申請日期
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2003.11.13
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專利名稱
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高中和活性抗腫瘤壞死因子單克隆抗體的可變區(qū)基因及其制備
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主分類號
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C07K14/525
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分類號
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C07K14/525;C07K16/18;C07H21/04;C12P19/34;C12P21/08
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學
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發(fā)明(設(shè)計)人
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金伯泉;劉雪松;楊琨;朱參勝
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地址
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710032陜西省西安市長樂西路17號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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西安通大專利代理有限責任公司
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代理人
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李鄭建
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國省代碼
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陜西;61
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主權(quán)項
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一種高中和活性抗腫瘤壞死因子單克隆抗體的可變區(qū)基因，其特征在于，包括D2VL和D2VH基因序列和氨基酸序列分別為：D2VL基因序列和氨基酸序列包括CDR1、CDR2和CDR3核苷酸序列和氨基酸序列如下：325gacattcagctgacccagtctccagccatcctgtctgtgagtccaDIQLTQSPAILSVSP280ggagaaagagtcagtttctcctgcagggccagtcagagcattggcGERVSFSCRASQSIG235acaagcatacattggtatcagcaaagaacaaatggttctccaaggTSIHWYQQRTNGSPR190cttctcataaagtatacttctgagtctatctctggcctcccttccLLIKYTSESISGLPS145aggtttagtggcagtggatcagggacagattttactcttaccatcRFSGSGSGTDFTLTI100agcagtgtggagtctgaagatattgcagattattactgtcaacaaSSVESEDIADYYCQQ55agttataactggccaacgttcacgttcggaggggggaccaagctgSYNWPTFTFGGGTKL10gagatctaa2EI*CDR1：AgggccagtcagagcattggcacaagcatacatRASQSIGTSIHCDR2：tatacttctgagtctatctctYTSESISCDR3：caacaaagttataactggccaacgttcacgQQSYNWPTFTD2VH基因序列和氨基酸序列包括CDR1、CDR2和CDR3核苷酸序列和氨基酸序列如下：342ctgcagcagtctgggactgtgctggcaaggcctgggacttccgtgLQQSGTVLARPGTSV297aagatgtcctgcaaggcttctggctacaacttcaccagctactggKMSCKASGYNFTSYW252atgcactgggtaaaacagaggcctggacagggtctagaatggattMHWVKQRPGQGLEWI207ggtgctctttttcctggaaacagtgatacgacctacaaggagatgGALFPGNSDTTYKEM162ttgaagggcagggccaaactgactgcagccacatccgccagtattLKGRAKLTAATSASI117gcctacttggagttcagcagcctgacaaatgaggattctgcggtcAYLEFSSLTNEDSAV72tattactgtgcaagaggcgatttcggcgctatggactactggggcYYCARGDFGAMDYWG27caagggaccacggtcaccgtctcctca1QGTTVTVSSCDR1：agctactggatgcacSYWMHCDR2：gctctttttcctggaaacagtgatacgacctacaaggagatgttgaagggcaggALFPGNSDTTYKEMLKGRCDR3：ggcgatttcggcgctatggactacGDFGAMDY
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摘要
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本發(fā)明公開了一種高中和活性抗腫瘤壞死因子(TNF)單克隆抗體(D2 mAb)的可變區(qū)基因的制備方法。用重組人TNF免疫BALB/c小鼠，制備一組小鼠抗人TNF單克隆抗體。通過體外阻斷實驗，從中篩選出具有高中和活性的抗人TNF單克隆抗體�？寺≡搯慰寺】贵w輕鏈和重鏈可變區(qū)基因，獲得該單克隆抗體輕鏈和重鏈可變區(qū)基因序列和氨基酸序列，確認該基因序列和蛋白序列的唯一性。本發(fā)明選用高中和活性D2雜交瘤細胞株，成功的從其中克隆出輕、重鏈可變區(qū)基因，測序后，得到其獨特的核苷酸序列，編碼該可變區(qū)的基因序列在構(gòu)建對炎癥、自身免疫性疾病等有治療作用的嵌合抗體和人源化抗體等方面有巨大的潛在價值。
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國際公布
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