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表達傳染性囊病病毒VP2蛋白的重組T4噬菌體的構建及其應用

公開(公告)號 CN1554749A  
公開(公告)日 2004.12.15  
申請(專利)號 CN200310117515.1  
申請日期 2003.12.25  
專利名稱 表達傳染性囊病病毒VP2蛋白的重組T4噬菌體的構建及其應用  
主分類號 C12N7/01  
分類號 C12N7/01;C12N15/40;C12N15/73;A61K39/12  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權  
申請(專利權)人 華南農(nóng)業(yè)大學  
發(fā)明(設計)人 曹永長;畢英佐;史泉城;馬靜云  
地址 510642廣東省廣州市天河區(qū)五山華南農(nóng)業(yè)大學  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構  
代理人  
國省代碼 廣東;44  
主權項 含有傳染性囊病病毒VP2蛋白的重組T4噬菌體的構建方法,其特征在采用基因重組的方法獲得的,其方法是:用EcoRI在37℃分別消化vp2基因的PCR產(chǎn)物和質(zhì)粒pR,接著在T4連接酶的作用之下,連接消化的vp2的PCR產(chǎn)物和質(zhì)粒pR,用連接產(chǎn)物轉化大腸桿菌DH5α,經(jīng)Ampr抗性篩選,獲得插入了vp2基因的重組子,然后用1對特異性引物SOC-S/VP2-A進行PCR篩選;對PCR篩選陽性的細菌,挑取單菌落接種于3mLLA培養(yǎng)基中,37℃,200r/m振搖培養(yǎng)16-20小時,抽提質(zhì)粒,再經(jīng)限制性內(nèi)切酶消化和序列測定,獲得含有傳染性囊病病毒vp2基因的重組整合質(zhì)粒pR-VP2;用重組整合質(zhì)粒pR-VP2和缺陷性T4噬菌體T4-Z1進行同源重組,獲得表達VP2蛋白的重組T4噬菌體。  
摘要 本發(fā)明提供了一個表達雞傳染性囊病病毒結構蛋白VP2的重組T4噬菌體,該重組T4噬菌體具有傳染性囊病病毒VP2基因的核苷酸序列和VP2蛋白的基酸殘基序列。本發(fā)明還涉及重組T4噬菌體在傳染性囊病疫苗免疫和傳染性囊病病毒抗體檢測中的應用。  
國際公布  
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