| 公開(公告)號(hào) | CN1195868C |
| 公開(公告)日 | 2005.04.06 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN00129579.9 |
| 申請(qǐng)日期 | 2000.10.08 |
| 專利名稱 | 一種體外免疫人B淋巴細(xì)胞生產(chǎn)人單克隆抗體的方法 |
| 主分類號(hào) | C12P21/08 |
| 分類號(hào) | C12P21/08 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 于永利 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 于永利 |
| 地址 | 100086 北京市海淀區(qū)海淀路169號(hào)興發(fā)大廈510室北京迪威仁方生物技術(shù)有限公司 |
| 頒證日 | |
| 國際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 北京海虹嘉誠知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 |
| 代理人 | 張濤 |
| 國省代碼 | 北京;11 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種體外生產(chǎn)人源化單克隆抗體的方法，其特征在于用加載抗原的人樹突狀細(xì)胞免疫人外周血單個(gè)核細(xì)胞，然后用EB病毒轉(zhuǎn)化其中的生產(chǎn)特異性抗體的B淋巴細(xì)胞，以生產(chǎn)針對(duì)上述抗原的特異性人源化單克隆抗體；進(jìn)一步，其特征在于該方法包括以下步驟：(1)分離、培養(yǎng)與鑒定人樹突狀細(xì)胞；(2)應(yīng)用抗原加載由上述步驟(1)得到的人樹突狀細(xì)胞；(3)分離人外周血單個(gè)核細(xì)胞；(4)應(yīng)用由上述步驟(2)得到的加載抗原的人樹突狀細(xì)胞免疫由上述步驟(3)得到的人B淋巴細(xì)胞；(5)應(yīng)用EB病毒轉(zhuǎn)化由上述步驟(4)得到的被免疫的人B淋巴細(xì)胞；(6)克隆化培養(yǎng)由上述步驟(5)得到的轉(zhuǎn)化細(xì)胞；(7)應(yīng)用ELISA方法篩選由上述步驟(6)得到的生產(chǎn)針對(duì)上述抗原的特異性單克隆抗體的轉(zhuǎn)化細(xì)胞克隆；(8)擴(kuò)增、保存由上述步驟(7)得到的生產(chǎn)上述特異性單克隆抗體的B淋巴細(xì)胞；(9)培養(yǎng)由上述步驟(8)得到的生產(chǎn)上述特異性人單克隆抗體的B淋巴細(xì)胞；(10)分離純化由上述步驟(9)得到的針對(duì)上述抗原的特異性人源化單克隆抗體。 |
| 摘要 | 本發(fā)明提供了一種用加載抗原的人樹突狀細(xì)胞體外免疫人外周血單個(gè)核細(xì)胞，然后用EB病毒轉(zhuǎn)化其中的生產(chǎn)特異性抗體的B淋巴細(xì)胞進(jìn)而生產(chǎn)針對(duì)上述抗原的人源化單克隆抗體的方法。使用本發(fā)明所提供的方法可獲得生產(chǎn)針對(duì)上述抗原的人源化單克隆抗體的人B淋巴細(xì)胞克隆，培養(yǎng)這些人B淋巴細(xì)胞就可生產(chǎn)針對(duì)各種抗原的、具有臨床治療和臨床診斷價(jià)值的人源化單克隆抗體。本方法既適用于在實(shí)驗(yàn)室水平制備人單克隆抗體，也適用于人單克隆抗體的工業(yè)化生產(chǎn)。 |
| 國際公布 |
