| 公開(公告)號 | CN1657616A |
| 公開(公告)日 | 2005.08.24 |
| 申請(專利)號 | CN200510038289.7 |
| 申請日期 | 2005.01.25 |
| 專利名稱 | 高抗病毒活性重組雞γ-干擾素(rChIFN-γ)的制取方法及用途 |
| 主分類號 | C12N15/09 |
| 分類號 | C12N15/09;C12N15/63;C12N15/23;A61K38/21 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 揚州大學 |
| 發(fā)明(設計)人 | 秦愛建;許金俊;孔桂美;劉岳龍;金文杰 |
| 地址 | 225009江蘇省揚州市大學南路88號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 揚州市錦江專利事務所 |
| 代理人 | 江平 |
| 國省代碼 | 江蘇;32 |
| 主權(quán)項 | 一種高抗病毒活性重組雞γ-干擾素(rChIFN-γ)的制取方法，其特征在于由以下步驟制得：a、將ChIFN-γ基因從真核質(zhì)粒pcDNA-ChIFN-γ中用EcoRI和NotI雙酶切后克隆到轉(zhuǎn)移載體pFASTBAC1中，獲得重組轉(zhuǎn)移質(zhì)粒pFASTBAC1-ChIFN-γ；b、取DH10Bac感受態(tài)細胞，加入lngpFASTBAC1-ChIFN-γ，轉(zhuǎn)座后，用SOC培養(yǎng)基10倍梯度稀釋培養(yǎng)物，各取100μl涂布Luria平板，37℃培養(yǎng)24～48小時，挑取白色菌落，Luria平板進行四次篩選純化，陽性質(zhì)粒命名為Bacmid-ChIFN-γ，提取陽性質(zhì)粒DNA用于下一步轉(zhuǎn)染；c、取上述重組DNA質(zhì)粒(Bacmid-ChIFN-γ)轉(zhuǎn)染Sf9細胞。 |
| 摘要 | 高抗病毒活性重組雞γ-干擾素的制取方法及用途，涉及一種廣譜高效抗病毒基因工程產(chǎn)品的制取方法。將ChIFN-γ基因從真核質(zhì)粒中經(jīng)雙酶切后克隆到轉(zhuǎn)移載體中，獲得重組轉(zhuǎn)移質(zhì)粒pFASTBAC1-ChIFN-γ；取DH10Bac感受態(tài)細胞，加入1ng pFASTBAC1-ChIFN-γ，轉(zhuǎn)座后，用SOC培養(yǎng)基稀釋培養(yǎng)物，涂布Luria平板，培養(yǎng)后，挑取白色菌落，Luria平板進行純化，陽性質(zhì)粒命名為Bacmid-ChIFN-γ，提取陽性質(zhì)粒DNA；取上述重組DNA質(zhì)粒轉(zhuǎn)染Sf9細胞，制得高抗病毒活性重組雞γ-干擾素。本發(fā)明還在于將該干擾素用于抑制MDV GA對CEF的致病變作用、抑制NDV F48E8在細胞上的增殖、抗AIV(H5N1)病毒對細胞的致病作用。 |
| 國際公布 |
