公開(公告)號(hào)
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CN1234727C
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公開(公告)日
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2006.01.04
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN00107954.9
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申請(qǐng)日期
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2000.06.01
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專利名稱
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人胸腺素α原基因突變體合成、表達(dá)及應(yīng)用
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主分類號(hào)
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C07K14/435(2006.01)I
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分類號(hào)
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C07K14/435(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)N;C12N15/64(2006.01)N;A61K38/17(2006.01)N;A61P1/16(2006.01)N;A61P35/00(2006.01)N;A61P37/00(2006.01)N
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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北京雙鷺?biāo)帢I(yè)股份有限公司
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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徐明波;王勇波;黃向東;趙 冰;盧安京
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地址
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100041北京市石景山區(qū)八大處高科技園區(qū)
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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代理人
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國(guó)省代碼
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北京;11
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主權(quán)項(xiàng)
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一種編碼人胸腺素α原的基因,其DNA序列如表1所示。
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摘要
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本發(fā)明涉及一種重組人胸腺素α原(Pro Tα)的制備方法。本發(fā)明利用遺傳密碼的兼并性,設(shè)計(jì)了大腸桿菌偏愛的密碼子,降低了DNA序列中的GC含量,合成了Pro Tα的DNA序列。將PCR擴(kuò)增的人Pro Tα基因與原核表達(dá)載體如pBV220組裝成高效表達(dá)質(zhì)粒,轉(zhuǎn)化大腸桿菌后用溫度誘導(dǎo)Pro Tα基因表達(dá),表達(dá)量達(dá)到菌體總蛋白的20-25%。工程菌經(jīng)發(fā)酵擴(kuò)增,破碎后保留上清。上清經(jīng)熱處理后,進(jìn)行陰離子交換層析和凝膠排阻層析二步法純化產(chǎn)品。純品加保護(hù)劑后制成藥用凍干制劑。該制劑可用于人類免疫缺陷性疾病、病毒性肝炎和癌癥的治療。
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國(guó)際公布
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