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乙型肝炎病毒突變位點的肽核酸檢測芯片及其制備方法

公開(公告)號 CN1236070C  
公開(公告)日 2006.01.11  
申請(專利)號 CN02135626.2  
申請日期 2002.10.14  
專利名稱 乙型肝炎病毒突變位點的肽核酸檢測芯片及其制備方法  
主分類號 C12Q1/68(2006.01)I  
分類號 C12Q1/68(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 山東省醫(yī)藥生物技術(shù)研究中心  
發(fā)明(設(shè)計)人 韓金祥;魯艷芹  
地址 250062山東省濟(jì)南市經(jīng)十路89號  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 濟(jì)南三達(dá)專利事務(wù)所  
代理人 李健康  
國省代碼 山東;37  
主權(quán)項 一種乙型肝炎病毒突變位點的肽核酸檢測芯片,包括基片和陣列式分布的肽核酸探針與對照的點涂層,所述的基片是玻璃基片,尼龍膜之一,其特征在于,所述的基片是未經(jīng)任何修飾的玻璃裸片、醛基化玻璃片和基化玻片之一,所述的肽核酸探針與對照的點涂層是指在基片上均勻分布的,包括乙肝前核心抗原區(qū)(前C區(qū))和表面抗原區(qū)(S區(qū))已知突變位點和野生位點的24條肽核酸檢測探針,2條陽性肽核酸探針,1條陰性探針及空白點樣液對照,其中,所述24條肽核酸檢測探針的序列結(jié)構(gòu)分別是,S1:ACATAGAGGTTCCTTGA-O-連接子,S2:ACATAGAGATTCCTTGA-O-連接子,S3:GGGAAACATAGAGGTTC-O-連接子,S4:GGGAAACACAGAGGTTC-O-連接子,S5:AGGGAAACATAGAGGTT-O-連接子,S6:AGGGAAACGTAGAGGTT-O-連接子,S7:GTTTCCGTCCGAAGG-O-連接子,S8:GTTTCCGGCCGAAGG-O-連接子,S9:CAGTTTCCGTCCGAA-O-連接子,S10:CAGTTTCTGTCCGAA-O-連接子,C1:ACAAAGACCTTTAACCTA-O-連接子,C2:ACAAAGATCATTAACCTA-O-連接子,C3:GAACAGTAGGACATGA-O-連接子,C4:GAACAGTGGGACATGA-O-連接子,C5:GCTTGAACAGTAGGAC-O-連接子,C6:GCTTGAAAAGTAGGAC-O-連接子,C7:CATGCCCCAAAGCCA-O-連接子,C8:CATGCCCTAAAGCCA-O-連接子,C9:CCATGCCCCAAAGC-O-連接子,C10:CCATGCTCCAAAGC-O-連接子,C11:GTCCATGCCCCAAAG-O-連接子,C12:GTCCATGTCCCAAAG-O-連接子,C13:ATGTCCACGCCCCAA-O-連接子,C14:ATGTCCATGCCCCAA-O-連接子;所述2條陽性肽核酸探針的序列結(jié)構(gòu)分別是,PCS:TGGGATGGGAATACA-O-連接子,PCC:ATGCCTACAGCCTCC-O-連接子;所述陰性探針的序列結(jié)構(gòu)是,NC:GAGCAACTGTACCAAGA-O-連接子;所述的肽核酸檢測探針與對照的點涂層的大小是:當(dāng)點直徑為100μm,點間距為300μm時,肽核酸陣列的大小為1.6mm×1.6mm。  
摘要 本發(fā)明公開了一種乙型肝炎病毒突變位點的肽核酸檢測芯片及其制備方法,芯片包括基片和陣列式分布的肽核酸探針與對照的點涂層,基片是玻璃基片,尼龍膜之一;肽核酸探針與對照的點涂層是指含有乙肝前核心抗原區(qū)和表面抗原區(qū)已知突變位點和野生位點的24條檢測探針,2條陽性對照探針,1條陰性對照探針及空白點樣液對照;乙肝病毒DNA樣品的PCR擴(kuò)增利用帶有T3啟動子的引物,PCR產(chǎn)物經(jīng)體外轉(zhuǎn)錄進(jìn)行熒光標(biāo)記,所得單鏈RNA經(jīng)片段化與肽核酸芯片雜交,由雜交信號的強(qiáng)弱來分析突變位點。本芯片同時平行檢測乙肝前核心抗原區(qū)和表面抗原區(qū)已知的突變位點,具有快速、高效、診斷精確的特點。  
國際公布  
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