公開(公告)號 | CN1727361A |
公開(公告)日 | 2006.02.01 |
申請(專利)號 | CN200410050936.1 |
申請日期 | 2004.07.28 |
專利名稱 | 重組人干擾素α1b的純化工藝 |
主分類號 | C07K14/56(2006.01)I |
分類號 | C07K14/56(2006.01)I;C07K1/36(2006.01)I |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權(quán) | |
申請(專利權(quán))人 | 深圳科興生物工程股份有限公司 |
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 何 詢;于德強(qiáng);張 為 |
地址 | 518057廣東省深圳市南山區(qū)科技工業(yè)園科技路13號 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進(jìn)入國家日期 | |
專利代理機(jī)構(gòu) | 深圳睿智專利事務(wù)所 |
代理人 | 陳鴻蔭;周惠來 |
國省代碼 | 廣東;44 |
主權(quán)項(xiàng) | 一種重組人干擾素α1b的純化工藝,用于從表達(dá)人干擾素α1b的工程菌中提取重組人干擾素α1b,包括細(xì)菌破碎,以及目標(biāo)蛋白的捕獲、中間純化和精制過程,其特征在于:所述目標(biāo)蛋白的捕獲過程采用擴(kuò)張床吸附,中間純化過程采用親合層析,精制過程采用凝膠過濾。 |
摘要 | 一種重組人干擾素α1b的純化工藝,用于從表達(dá)人干擾素α1b的工程菌中提取重組人干擾素α1b,包括細(xì)菌破碎、擴(kuò)張床吸附、親合層析和凝膠過濾步驟。細(xì)菌破碎是在Tris-HCl緩沖液中進(jìn)行;所述擴(kuò)張床吸附步驟中,選用陰離子凝膠,緩沖體系選用pH值為7.4的Tris-HCl,并選用0.4MNaCl pH7.4 50mM Tris-Hcl洗脫液一步洗脫。所述親和層析步驟中,選用α1b干擾素的單克隆抗體偶聯(lián)的凝膠;平衡液采用PBS,清洗液采用PBS,洗脫液采用0.1M Gly-HCl,再生液采用0.1M Tris-HCl及0.1M NaAc-HAc緩沖液。所述凝膠過濾步驟中,選用Sephacryl凝膠,緩沖體系選用PBS。采用本重組人干擾素α1b的純化工藝,生產(chǎn)效率可以大大提高,生產(chǎn)成本則大大降低。 |
國際公布 |