公開(公告)號
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CN1884496A
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公開(公告)日
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2006.12.27
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申請(專利)號
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CN200610044680.2
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申請日期
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2006.06.12
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專利名稱
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逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系和肝細(xì)胞靶向性導(dǎo)入方法
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主分類號
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C12N5/10(2006.01)I
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分類號
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C12N5/10(2006.01)I;C12N15/867(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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山東省醫(yī)藥生物技術(shù)研究中心
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發(fā)明(設(shè)計)人
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魯艷芹;韓金祥;王傳璽;戚 鵬;欒中華
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地址
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250062山東省濟南市歷下區(qū)經(jīng)十路89號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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濟南金迪知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
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代理人
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鮑光明
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國省代碼
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山東;37
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主權(quán)項
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一種逆轉(zhuǎn)錄病毒的包裝細(xì)胞系,含有Mo MLV和HBV的gag-pol、env-pres2基因的載體,其中env基因為嵌合基因,它含有pit1和pit2受體,可與靶細(xì)胞表面的pit1和pit2結(jié)合且相互影響,介導(dǎo)逆轉(zhuǎn)錄病毒感染靶細(xì)胞,其中逆轉(zhuǎn)錄病毒表面糖蛋白的第60位Tyr和第61位Val氨基酸殘基對受體的識別起著決定性的作用,在其基因序列中引入限制性內(nèi)切酶位點Sal I使其定點突變,將上述兩個質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染NIH3T3細(xì)胞,加壓篩選得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞系,將逆轉(zhuǎn)錄載體轉(zhuǎn)染此細(xì)胞系后,可以包裝出逆轉(zhuǎn)錄病毒,此病毒能夠特異性地感染肝細(xì)胞。
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摘要
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本發(fā)明涉及一種逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系和肝細(xì)胞靶向性導(dǎo)入方法。該方法是組建新的逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系,該細(xì)胞系能表達病毒包裝所必備的GAG-POL,以及ENV-PHSA-R融合蛋白,同時,env上對病毒感染起關(guān)鍵作用的基因被定點突變。由于肝細(xì)胞表面存在PHSA-R,逆轉(zhuǎn)錄病毒可通過PHSA介導(dǎo),借助肝細(xì)胞表面的相應(yīng)受體特異性地感染肝細(xì)胞,實現(xiàn)基因定向轉(zhuǎn)移,使基因能夠被特異運送至靶器官和靶細(xì)胞。因此,通過肝細(xì)胞靶向性系統(tǒng)可能成為肝炎基因治療中確實有效的方法之一。
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國際公布
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