方法名稱： |
兩面針-氯化兩面針-含量測(cè)定-HPLC-UV |
應(yīng)用范圍： |
用于測(cè)定兩面針中氯化兩面針堿含量 |
方法原理： |
本品加甲醇索氏提取，經(jīng)液相色譜分離，在271 nm處測(cè)定峰面積，外標(biāo)法計(jì)算含量 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器 日本島津LC-10AT VP高效液相色譜儀、SPD-10AVP紫外檢測(cè)器；威瑪龍色譜數(shù)據(jù)處理工作站 色譜條件 色譜柱：Reliasil C18 （4.6 mm ×250 mm，5 μm)；流動(dòng)相：乙腈-水-三乙胺-磷酸（25∶75∶1∶1)；檢測(cè)波長(zhǎng)：271 nm；柱溫：室溫 |
試樣制備： |
對(duì)照品溶液制備 精密稱取氯化兩面針堿對(duì)照品24 mg，用少量甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至10 mL容量瓶中，加甲醇至刻度處，搖勻，制得濃度為2.4 mg/mL的氯化兩面針堿對(duì)照品儲(chǔ)液Ⅰ；再精密吸取0.5 mL對(duì)照品儲(chǔ)液Ⅰ至25 mL容量瓶中，加入甲醇至刻度處，搖勻，制得濃度為48 μg/mL的氯化兩面針堿對(duì)照品儲(chǔ)液Ⅱ；再精密吸取1 mL對(duì)照品儲(chǔ)液Ⅱ至5 mL容量瓶中，加流動(dòng)相至刻度處，搖勻，配成每1 mL含9.6 μg氯化兩面針堿的對(duì)照品溶液。 供試品溶液制備 精密稱取樣品粗粉約1 g，置于索氏提取器中，用5 mL鹽酸（5→100)浸潤(rùn)30 min 后，加入100 mL甲醇，加熱回流6 h，回收甲醇，蒸干，用甲醇溶解定容至25mL，搖勻，過(guò)濾，取續(xù)濾液1 mL置于25 mL容量瓶中，用流動(dòng)相定容，搖勻，用0.45 μm的微孔濾膜濾過(guò)，棄去初濾液，取續(xù)濾液作為供試品溶液。 |
操作步驟： |
分別精密吸取氯化兩面針堿對(duì)照液以及兩面針供試品溶液各20 μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算氯化兩面針堿含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
覃蘭芳，賴茂祥，梁威.RP-HPLC 法測(cè)定不同產(chǎn)地兩面針中氯化兩面針堿含量.廣西科學(xué). 2006，13（4)：297～299 |
