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蟲草菌粉--核苷類成分的含量測定方法--HPLC法

  
方法名稱:
  蟲草菌粉--核苷類成分的含量測定--HPLC法
應用范圍:
  測定蟲草菌粉中核苷類成分的含量
方法原理:
 樣品加甲醇超聲提取,經(jīng)液相色譜儀分離,在260nm測定峰面積,標準曲線法測定各核苷類成分含量。
儀器設(shè)備及實驗條件:
 

儀器設(shè)備  Agilent 1100 高效液相色譜儀(四元泵、自動進樣器、柱溫箱、二極管陣列檢測器);

色譜條件 色譜柱:Polaris 5μm, C18-A, 250mm ×4.6mm;流動相:乙腈-水;流速:0.5~1.0mL·min-1梯度洗脫;柱溫:25℃。
試樣制備:
 

標準曲線的制備

對照品溶液的制備

①精密稱取尿嘧啶對照品4. 52 mg10mL量瓶中,加入少量甲醇溶解,并加甲醇稀釋至刻度。配成0. 452mg·mL-1的溶液。

②精密稱取尿苷對照品3.36mg 10mL量瓶中,加入少量甲醇溶解,并加甲醇稀釋至刻度。配成0. 336mg·mL-1的溶液。

③精密稱取腺嘌呤對照品2.04mg 10mL量瓶中,加入少量甲醇溶解,并加甲醇稀釋至刻度。配成0. 204mg·mL-1的溶液。

④精密稱取腺苷對照品2.17mg10mL量瓶中,加入少量甲醇溶解,并加甲醇稀釋至刻度。配成0. 217mg·mL-1的溶液。

分別取對照品溶液各1.0mL混合均勻,用0.45μm的微孔濾膜濾過,取續(xù)濾液0.10.5,1.0,1.5,2.04.0μL注入高效液相色譜儀以色譜峰峰面積對進樣量回歸,即得。

   供試品溶液的制備  分別取60℃干燥的蟲草菌粉約0.1 g,精密稱定,加入甲醇10mL,超聲處理40min,濾過,濾液水浴蒸干,殘留物用甲醇溶解后定容至2mL,即得。
操作步驟:
  依供試品溶液的制備方法,制得蟲草粉供試品溶液,取10μL注入高效液相色譜儀進行分析,計算得各核苷含量。
附件:
  點擊下載 (解壓密碼:m.gydjdsj.org.cn)
備注:
 
參考文獻:
  袁永生,張莉,許效楓等.反相高效液相法測定蟲草菌粉中核苷類成分的含量.中國藥學雜志.2002,37(10):776-778
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