方法名稱(chēng)： |
燒傷靈酊－大黃素的測(cè)定－高效液相色譜法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用高效液相色譜法測(cè)定燒傷靈酊中大黃素的含量。 本方法適用于中成藥燒傷靈酊。 |
方法原理： |
供試品用硅膠分離出大黃素，洗脫液稀釋后進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)254nm處檢測(cè)大黃素的峰面積，計(jì)算出其含量。 |
試劑： |
1 甲醇 2 石油醚60～90°C 3 甲酸乙酯 4 甲酸 5 無(wú)水乙醇 6 磷酸溶液，0.1％ 7 硅膠（色譜用，60～160目) 8 五氧化二磷 |
儀器設(shè)備： |
1 儀器 1.1 高效液相色譜儀 1.2 色譜柱 十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按大黃素峰計(jì)應(yīng)不低于2000。 1.3 紫外吸收檢測(cè)器 2 色譜條件 2.1 流動(dòng)相：甲醇 0.1％磷酸溶液 = 85 15 2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm 2.3 柱溫：室溫 |
試樣制備： |
1.稱(chēng)取供試品 精密量取本品2mL。 2.對(duì)照品溶液的制備 取大黃素對(duì)照品（經(jīng)五氧化二磷干燥過(guò)夜)適量，精密稱(chēng)定，加無(wú)水乙醇溶解，制成每1mL含0.01mg的溶液。 3.供試品溶液的制備 供試品置蒸發(fā)皿中，加硅膠1g，置溫水浴上蒸干，移至硅膠色譜柱（2g，內(nèi)徑17mm，干法裝柱)，用石油醚－甲酸乙酯－甲酸（100：100：2)混合溶液90mL分次減壓洗脫，收集洗脫液，置100mL量瓶中，并用混合溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。 注：“精密稱(chēng)取”系指稱(chēng)取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱(chēng)取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟： |
分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)254nm處測(cè)定大黃素（C15H10O5)的峰面積，計(jì)算出其含量。 |
參考文獻(xiàn)： |
中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p578。 |
