瓦松－槲皮素、山柰素的測定－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定瓦松中槲皮素、山柰素的含量。

本方法適用于景天科植物瓦松Orostachys fimbriatus (Turcz.) Berg.的干燥地上部分。

本品粉末置具塞錐形瓶中，加甲醇-25%鹽酸溶液（4：1)的混合溶液，水浴回流，冷卻，用甲醇補(bǔ)重，搖勻，濾過，續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長360nm處檢測槲皮素、山柰素的吸收值，計(jì)算出其含量。

1. 甲醇

2. 甲醇-25%鹽酸溶液（4：1)的混合溶液

3. 0.5%磷酸溶液

1 儀器

1.1高效液相色譜儀

1.2色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按槲皮素峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。

1.3 紫外吸收檢測器

2色譜條件

2.1流動(dòng)相：甲醇 0.5%磷酸溶液＝47 53

2.2檢測波長：360nm

2.3柱溫：室溫

1. 稱取供試品

精密稱取本品粉末（過三號篩)1g, 為供試品。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取槲皮素對照品、山柰素對照品適量，加甲醇制成每1mL含槲皮素10mg、山柰素20mg的混合溶液。

3. 供試品溶液的制備

取本品粉末（過三號篩)約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇-25%鹽酸溶液（4：1)混合溶液50mL，密塞，稱定重量，置水浴中回流1小時(shí)，立即冷卻，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取對照品溶液10mL和供試品溶液10~20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長360nm處測定槲皮素（C₁₅H₁₀O₇)和山柰素（C₁₅H₁₀O₆)的峰面積，計(jì)算出其含量。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p47。