一清片—鹽酸小檗堿的測(cè)定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定一清片中鹽酸小檗堿的含量。

本方法適用于大黃、黃連和黃芩組成的片劑。

本方法為高效液相色譜法，紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)350nm處檢測(cè)鹽酸小檗堿的吸收值，外標(biāo)法計(jì)算含量。本法操作簡(jiǎn)便、精密度高、分離效果良好。

1.乙腈（色譜純)

2.硝酸銨（分析純)

3. 鹽酸小檗堿對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所,713 9204)

4. 一清片為市售品

1 儀器

1.1高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

Inertsil ODS C18色譜柱(5μm ,150mm×416 mm), 柱溫30℃,進(jìn)樣量10μl。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：乙腈:0.4 mol·L^-1NH₄NO₃溶液(35∶65).

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：350nm。

1. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取鹽酸小檗堿對(duì)照品適量,加流動(dòng)相制成36μｇ·ｍl^-1的對(duì)照品溶液。

2.供試品溶液的制備

本品20片,精密稱定,研細(xì),取約0.1g,精密稱定,置100ml 量瓶中,加含0.5%鹽酸的甲醇溶液50ml,超聲處理30min ,冷卻至室溫,加含0.5%鹽酸的甲醇溶液稀釋至刻度,搖勻;取此液離心10min (1000r·min-1) ,分取上清液,作為供試品溶液。按處方比例同法制得缺黃連陰性空白溶液。

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

取上述各對(duì)照品溶液2, 4, 6, 8, 10μl,依次進(jìn)樣,記錄色譜圖。以進(jìn)樣量對(duì)峰面積進(jìn)行回歸得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程。

2. 供試品的測(cè)定

精密吸取供試品溶液10μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)350nm處測(cè)定吸收值，計(jì)算出其含量。

向旭明,王旭東.HPLC 測(cè)定一清片中的鹽酸小檗堿.華西藥學(xué)雜志,2002 ,17(4) :293-294