方法名稱： |
復(fù)方丹參片—三七皂甙R1的測(cè)定—高效液相色譜法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方丹參片中三七皂甙R1的含量。 本方法適用于中藥制劑復(fù)方丹參片。 |
方法原理： |
供試品于錐形瓶中，加甲醇回流提取，過濾，濾液置中性氧化鋁柱上，收集40%甲醇洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状既芙舛ㄈ荩^濾，濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用差示檢測(cè)器，檢測(cè)三七皂甙R1的吸收值，計(jì)算出其含量。 |
試劑： |
1. 甲醇 2. 磷酸 3. 中性氧化鋁（100-200目) |
儀器設(shè)備： |
1. 儀器 1.1 高效液相色譜儀 1.2 色譜柱 C18色譜柱（250×4.6mm，5μm)。 1.3 示差檢測(cè)器 2. 色譜條件 2.1 流動(dòng)相：甲醇 水（磷酸調(diào)pH4)= 54 46 2.2柱溫：室溫 |
試樣制備： |
1. 稱取供試品 精密稱取本品去糖衣后研細(xì)的藥粉（過3號(hào)篩，50目)0.9g。 2. 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取三七皂甙R1對(duì)照品適量，用甲醇溶解制成每1mL含三七皂甙R10.4mg的對(duì)照品溶液。 3.供試品溶液的制備 取供試品置錐形瓶中，精密加入甲醇25mL，稱定重量，回流提取1h，放冷，補(bǔ)足重量，濾過，精密量取續(xù)濾液15mL，置中性氧化鋁柱（4g，0.9cm)上，加甲醇10mL洗脫，棄去洗脫液，再加40%甲醇60mL洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)?0%甲醇使溶解并定容于5mL量瓶，過濾，濾液為供試品溶液。 注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟： |
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 精密吸取上述對(duì)照品溶液2，4，6，8，10μL注入高效液相色譜儀，用示差檢測(cè)器測(cè)定三七皂甙R1的響應(yīng)值，以進(jìn)樣量對(duì)峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。 2. 供試品的測(cè)定 精密吸取供試品溶液10μL注入高效液相色譜儀，用示差檢測(cè)器測(cè)定三七皂甙R1的響應(yīng)值，計(jì)算出其含量。 |
參考文獻(xiàn)： |
邸峰，孫毅坤. 高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方丹參片中三七皂甙R1的含量. 中國(guó)中藥雜志，1996，21（11)：672-673. |
