普魯卡因青霉素—普魯卡因和青霉素的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定普魯卡因青霉素中普魯卡因(C₁₃H₂₀N₂O₂)和青霉素(C₁₆H₁₈N₂O₄)的含量。

本方法適用于普魯卡因青霉素中普魯卡因和青霉素的含量測定。

1. 乙腈

2. 40%氫氧化四丁基銨溶液

3. 10%的稀磷酸溶液

4. 1mol/L氫氧化鉀溶液

5. 磷酸二氫鉀

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：緩沖液（取磷酸二氫鉀14g和40%氫氧化四丁基銨溶液6.5g溶解于700mL水中，用1mol/L氫氧化鉀溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0，再加水稀釋至1000mL，搖勻)＋水 乙腈=52 23 25（用1mol/L氫氧化鉀溶液或10%的稀磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至7.5±0.05)

2.2 檢測波長：235nm

2.3 柱溫：室溫

1. 對照品溶液的制備

精密稱取普魯卡因?qū)φ掌泛颓嗝顾貙φ掌愤m量，加流動(dòng)相溶解并稀釋制成每1mL中分別含青霉素0.8mg和普魯卡因0.54mg的溶液，搖勻，即為對照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

取本品70mg，精密稱定，置50mL量瓶中，加流動(dòng)相約30mL，超聲使溶解后，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

分別精密量取供試品及對照品溶液10μL注入液相色譜儀，在235nm波長處檢測，記錄色譜圖。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.791-792。