多巴絲肼片—鹽酸左旋多巴和芐絲肼的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定多巴絲肼片中左旋多巴（C₉H₁₁NO₄)和鹽酸芐絲肼（C₁₀H₁₅N₃O₅ ·HCl)的含量。

本方法適用于多巴絲肼片。

供試品制成水溶液，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長270nm 和220nm處檢測左旋多巴和鹽酸芐絲肼吸收值，計算出其含量。

1. 0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液

2. 甲醇

3. 乙腈

4. 0.005mol/L癸烷磺酸鈉溶液

5. 磷酸

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按芐絲肼峰計算應不低于1000，左旋多巴峰與鹽酸芐絲肼峰的分離度應符合要求。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液 甲醇 乙腈=70.5 25 4.5，制成0.005mol/L癸烷磺酸鈉溶液，并用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.5。

2.2 檢測波長：左旋多巴270nm，待左旋多巴出峰完全后檢測波長改為220nm。

2.3 柱溫：室溫

1. 稱取供試品

取本品10片，精密稱定，研細，精密稱取本品適量（約相當于左旋多巴100mg，芐絲肼28.5mg)，置200mL量瓶中。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取鹽酸絲肼與鹽酸三羥芐基芐絲肼對照品適量，分別加流動相溶解并定量稀釋制成每1mL中含有0.285mg的溶液。

精密稱取左旋多巴對照品100mg與鹽酸芐絲肼對照品約28.5mg，置同一200mL量瓶中，加流動相適量振搖使溶解，精密加入上述鹽酸絲肼溶液2mL與鹽酸三羥芐基芐絲肼溶液3mL，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即得混合對照品溶液。

3. 供試品溶液的制備

將供試品流動相180mL超聲處理2分鐘，振搖15分鐘，用流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各20μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，先于波長270nm處測定左旋多巴的吸收值，待左旋多巴出峰完全后檢測波長改為220nm芐絲肼的吸收值，按外標峰面積法計算出其含量。