醫(yī)學(xué)免費(fèi)論文:鼻息肉及下鼻甲黏膜成纖維細(xì)胞中組胺受體的表達(dá)

1.2.4  統(tǒng)計(jì)學(xué)處理  觀察同一患者鼻息肉組織及下鼻甲黏膜成纖維細(xì)胞中各型組胺受體的表達(dá)，用實(shí)時(shí)擴(kuò)增了解１型及２型組胺受體表達(dá)程度.將目的基因交點(diǎn)與β�瞐ctin基因交點(diǎn)比值作為受體的表達(dá)程度并以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)偏差（±SD)來(lái)表示.用ＳＰＳＳ１２.０統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，進(jìn)行Mann�瞁hiteny’s U檢驗(yàn).

2  結(jié)果

RT�睵CR結(jié)果表明，可見(jiàn)１型及２型組胺受體mRNA表達(dá)，未見(jiàn)３型及４型組胺受體表達(dá)（圖2).實(shí)時(shí)擴(kuò)增結(jié)果見(jiàn)，鼻息肉組織成纖維細(xì)胞內(nèi)1型及2型組胺受體mRNA的表達(dá)較下鼻甲鼻黏膜成纖維細(xì)胞低，但相比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.19，P=0.14,圖3).流式細(xì)胞分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果示，無(wú)刺激時(shí)1型組胺受體蛋白的表達(dá)量在鼻息肉組織及下鼻甲黏膜組織中均極低，無(wú)顯著性差異（圖4),2型組胺受體蛋白的表達(dá)在下鼻甲黏膜組織較多（圖5).

3  討論

組胺生成于嗜中性粒細(xì)胞及肥大細(xì)胞，參與各種過(guò)敏反應(yīng).氣道上皮微環(huán)境中的肥大細(xì)胞可合成組胺，增加氣道的滲透性［15］.Jordana等［16］認(rèn)為，組胺可使體外培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞增殖，其作用是通過(guò)2型組胺受體完成的；thymikine可使體外培養(yǎng)的人皮膚成纖維細(xì)胞增殖，而組胺可通過(guò)1型組胺受體促進(jìn)蛋白激酶C及佛波酯酵素活性，抑制thymikine對(duì)成纖維細(xì)胞的增殖作用［17］.目前，對(duì)在鼻息肉的形成過(guò)程中成纖維細(xì)胞及成纖維細(xì)胞中的組胺受體所起的作用雖然尚未完全闡明，但可以肯定的是鼻息肉的形成僅與１型及２型組胺受體有關(guān)，而與３型及４型組胺受體則無(wú)關(guān).本研究結(jié)果亦表明，鼻息肉成纖維細(xì)胞中只可見(jiàn)1型及2型組胺受體的表達(dá)，而未見(jiàn)3型及4型的表達(dá).目前雖然對(duì)鼻息肉的形成過(guò)程尚無(wú)統(tǒng)一的認(rèn)識(shí)，但與變應(yīng)性鼻炎有關(guān)系的假設(shè)已被受重視.Okayama等［18］認(rèn)為，人鼻黏膜組織中分布的1型組胺受體主要分布于小動(dòng)脈、靜脈及海棉靜脈竇等血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)，而血管平滑肌及鼻黏膜下腺體等組織中則未見(jiàn)分布.Boucher等［19］報(bào)道，鼻黏膜切片組織中存在2型組胺受體的表達(dá)，且在變應(yīng)性鼻炎鼻黏膜組織中的表達(dá)強(qiáng)度明顯高于非變應(yīng)性鼻炎，且原位雜交分析亦支持上述結(jié)果.本研究采用流式細(xì)胞分析方法觀察了組胺受體蛋白的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)其表達(dá)量較少，但組胺受體蛋白可以細(xì)胞內(nèi)及外的形態(tài)表達(dá)，而流式細(xì)胞分析方法卻不能準(zhǔn)確地測(cè)定細(xì)胞內(nèi)的蛋白量.蛋白表達(dá)較少的原因考慮可能與如下幾點(diǎn)相關(guān)；1)可以肯定鼻息肉與下鼻甲黏膜成纖維細(xì)胞中有大量的組胺受體mRNA表達(dá)；2)組胺受體蛋白合成后受到某些其他代謝產(chǎn)物的影響，迅速溶解；3)大部分組胺受體蛋白僅在細(xì)胞內(nèi)停留，而未到達(dá)細(xì)胞膜表面；4)可能在某些因素的影響下蛋白質(zhì)翻譯受阻礙；5)需要特定的條件，如各種細(xì)胞因子刺激或特殊酶參與等.

【參考文獻(xiàn)】
［1］ Nakamura T, Itadani H, Hidaka Y, et al..Molecular cloning and characterization of a new human histmamine receptor, HH4R［J］.Biochem Biophysic Res Commun,2000,279:615.

［2］ Hill SJ, Ganelln CR, Timmerman H, et al..Internation union of pharmacology Ⅻ classification of histamine receptors［J］.American Society for Pharmacology and Experimental Therapeutics,1997，49:253.

［3］ Fukui H, Fujimoto K, Mizuguchi H, et al..Molecular cloning of the human histamine H1 receptor gene［J］.Biochem Biophys Res Commun,1994，201:894醫(yī).學(xué).全.在.線m.gydjdsj.org.cn.

［4］ Rotrosen D, Gallin J.Histmine type Ⅰ receptor occupancy increases endothelial cytosolic calciumu, reduces F�瞐ction, and promotes albumin diffusion across cultured endothelial monolayers［J］.J Cell Biol,1986,103:2379.

［5］ Kobayashi T, Inoue I, Jenkins NA, et al..Cloning, RNA expression, and chromosomal location of a mouse histamine H2receptor gene［J］.Genomics,1996，37:390.

［6］ Coge F, Guenin SP, Audinot V, et al..Gonomic organization and characterization of splice variants of the human histamine H3 receptor［J］.Biochem J,2001，355:279.

［7］ Arrang JM, Garbarg M, Schwartz JC.Actoin of brain histamine release mediated by a novel class(H3) of histamine receptor［J］.Nature,1983，302:382.

［8］ Oda T, Matsumoto S.Identification and characterization of histamine H4 receptor［J］.Nippon Yakurigaku Zasshi,2001，118:36.

［9］ Coge F, Guenin SP, Rique H, et al..Structure and expression of the human histamine H4�瞨eceptor gene［J］.Biochem Biophys Res Commun,2001,284：301.

［10］ Strieter RM, Phan SH, Showell HJ, et al..Monokines�瞚nduced neutrophil chemotactic factor gene expression in human fibroblasts［J］.J Biol Chem，1989，264:10621.

［11］ Yoshimura T, Yuhki N, Moore SK, et al..Human monocyte chemoattractant proteinI(MCP��1): Full length c�睤NA cloning, expression in mitogen�瞫timulated blood mononuclear leukocytes, and sequence similarity to murine competence gene［J］.JE FEBS Lett,1989，244:487.

［12］ Vancheri C, Gauldie J, Bienenstock J, et al..Human lung fibroblast�瞕erived granulocyte�瞞acrophage colony stimulating factor (GM�睠SF) mediates eosinophil survival in vitro［J］.Am J Respir Cell Mol Biol,1989，1:289.

［13］ Elias JA, Trinchieri G, Beck JM, et al..synergistic interaction of IL��6 and IL��1 mediates the thymocyte�瞫timulating activity produced by recombinant IL��1 stimulated fibroblasts［J］.J Immunol,1989，142:509.

［14］ Sato E, Haniuda M, Numanami H, et al..Histamine and serotonin stimulate eotaxin production by a human lung fibroblast cell line［J］.Arch Allergy Immunol,2002，128:12.

［15］ Boucher RC, Ranga V, Pare PD, et al..Effect of histamine and methacholine of guinea pig tracheal permeability to HRP［J］.J Appl Physiol,1978，45:939.

［16］ Jordana M, Befus AD, Newhouse MT, et al..Effect of histamine on proliferation or normal human adult lung fibroblast［J］.Thorax,1988，43:552.

［17］ Johnson CL, Johnson CG.Inhibition of human skin fibroblast proliferation by histamine and phorbol esters is mediated by protein kinase C［J］.Cell Signal,1990，2:105.

［18］ Okayama M, Baraniuk J, Hausfeld J, et al..Characterization and autoradiographic localization of histamine H1 receptors on human nasal turbinates［J］.J Allergy Clin Immunol,1992，89:1144.

［19］ Boucher RC, Ranga V, Pare PD, et al..Effect of histamine and methacholine of guinea pig tracheal permeability to HRP［J］.J Appl Physiol,1978，45:939.�F

上一頁(yè)  [1] [2] [3] [4]  下一頁(yè)