皖南醫(yī)學院教案首頁
授課時間：2007.12.24~2008.1.11 教案完成時間：2007.12.22
| 授課名稱： | 分子生物學 | 2006年級藥學 | 授課時間 | 07.12.31~08.1.28 | 學時 | 3 | |||
| 授課教師 | 孫玲玲 | 專業(yè)技術職務 | 副教授 | 教學班學生數(shù) | 30人 | ||||
| 教學目的 及任務 | 了解質粒的特性及其在分子生物學研究中的應用；掌握質粒DNA抽提的基本原理； 熟悉堿法抽提質粒 DNA的基本方法 。 | ||||||||
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大腸桿菌感受態(tài)細胞制備及轉化 一、講解（20分鐘) 實驗原理 1、 質粒的特性及其在分子生物學研究中的應用。 2、 質粒DNA提取的基本原理。 3、 堿法提取質粒DNA的基本方法 實驗操作及注意事項
二、學生操作（130分鐘) | |||||||||
| 本單元重點 | 質粒DNA抽提的基本原理；堿法抽提質粒 DNA的基本方法 。 | ||||||||
| 本單元難點 | 提取質粒DNA時防止大腸桿菌DNA的混入 | ||||||||
| 教學方法及準備 | 學生動手為主；教師講授指導為輔 | ||||||||
| 所用教材 | 畢富勇主編《生物化學及分子生物學實驗教程》安徽科技出版社 | ||||||||
| 參考資料 | 《分子生物學技術》《醫(yī)學細胞及分子生物學》 | ||||||||
| 教研室審閱意見 | |||||||||
（教案末頁)
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| 質粒(Plasmid)是一種染色體外的穩(wěn)定遺傳因子,大小從1-200kb不等,為雙鏈、閉環(huán)的DNA分子,并以超螺旋狀態(tài)存在于宿主細胞中。質粒主要發(fā)現(xiàn)于細菌、放線菌和真菌細胞中，它具有自主復制和轉錄能力,能在子代細胞中保持恒定的拷貝數(shù),并表達所攜帶的遺傳信息。 從細菌中分離質粒DNA的方法都包括3個基本步驟:培養(yǎng)細菌使質粒擴增；收集和裂解細胞;分離和純化質粒DNA。本實驗采用堿法從大腸桿菌中抽提質粒DNA，基本原理是細菌培養(yǎng)物加入SDS和NaOH溶液處理后，菌體裂解，可使細菌的質粒DNA、染色體DNA和RNA一起從細胞中釋放出來。細菌DNA比質粒DNA大得多，易受機械力和核酸酶等的作用而被切斷成大小不同的片段。共價閉環(huán)質粒以超螺旋形式存在，除了超螺旋外，還會產生其它形式的DNA，當提取的質粒電泳時，同一質粒DNA其超螺旋形式的泳動速度比開環(huán)和線狀分子的泳動速度快。 | ||
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或 作 業(yè) 題 | 1.何為質粒，有何特點？ 2. 溶液I、溶液II、溶液III在質粒抽提中各有何作用？ 3. 加入溶液I、溶液II、溶液III后的混勻方式有何不同，為什么？ | ||
| 教 學 效 果 與 分 析 | 質粒是小分子DNA，提取過程要注意混入大腸桿菌DNA及RNA。操作過程要注意加入溶液I、溶液II、溶液III的不同混勻方式并加入RNA酶。大多數(shù)小組均可看到帶有光澤的白色沉淀，結果是否理想，有待下次瓊脂糖凝膠電泳檢測。 |
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授課時間：2008.11.3-2008.11.7 教案完成時間：2008.10.18
| 授課名稱： | 生物化學 實驗 | 2007年級臨床專業(yè)1，9班 | 授課時間 | 11.3-11.7 | 學時 | 4 | |||
| 授課教師 | 吳明彩 | 專業(yè)技術職務 | 講師 | 教學班學生數(shù) | 30×3 | ||||
| 教學目的 及任務 | 掌握紙層析法鑒定轉氨酶的轉氨基作用的原理，掌握紙層析的基本技術。 | ||||||||
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實驗四 紙層析鑒定轉氨基作用 一. 講解部分 25分鐘 復習理論課相關內容（5分鐘)、介紹本次實驗原理（10分鐘)、實驗中的操作細節(jié)及其注意事項（10分鐘) 二.
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| 本單元重點 | 1. 肝臟的谷丙轉氨酶作用機制 2. 利用紙層析技術證明轉氨基作用。 | ||||||||
| 本單元難點 | 利用紙層析技術證明轉氨基作用。 | ||||||||
| 教學方法及準備 | 板書講授+課堂演示；板書 | ||||||||
| 所用教材 | 《生物化學及分子生物學實驗教程》畢富勇主編 安徽科學技術出版社 | ||||||||
| 參考資料 | 《生物化學實驗原理和方法》 李建武等編 北京大學出版社 | ||||||||
| 教研室審閱意見 | |||||||||
（教案末頁)
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| 轉氨基作用廣泛的存在于機體各組織器官中，是體內氨基酸代謝的重要途徑。每種轉氨基反應均由專一的轉氨酶催化，此酶催化氨基酸的α-氨基轉移到另一α-酮酸上。各種轉氨酶的活性不同，其中肝臟的谷丙轉氨酶的活性較高，它催化的反應為：
本實驗以丙氨酸和α-酮戊二酸為底物，加肝勻漿保溫后，用紙層析法證明轉氨基作用。 紙層析屬于分配層析。以濾紙為支持物，濾紙纖維與水親合力強，能吸收20-22%的水，而且其中6-7%的水是以氫鍵形式與纖維素的羥基結合，在一般情況下很難脫去；而濾紙纖維與有機溶劑的親合力甚弱。所以紙層析是以濾紙纖維結合水為固定相，以有機溶劑作為流動相。在用紙層析法分離氨基酸時，由于各種氨基酸在此二相中的分配系數(shù)不同，各有一定的遷移率。極性弱的氨基酸易溶于有機溶劑，即分配系數(shù)小，隨流動相移動較快；而極性強的氨基酸正相反，以次分離氨基酸。強調紙層析操作流程中關鍵操作步驟，培養(yǎng)學生良好的實驗習慣。 | ||
或 作 業(yè) 題 | 1轉氨基作用 2 層析 | ||
| 教 學 效 果 與 分 析 | 通過本次實驗，進一步鍛煉了學生的生化操作，并且使學生掌握紙層析法鑒定轉氨酶的轉氨基作用的原理，掌握紙層析的基本技術，注意實驗操作中細節(jié)問題，讓學生認識到實驗中認真操作的重要性。 |
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授課時間：2008.10.27---2008.10.31 教案完成時間：2008.10.20
| 授課名稱： | 生物化學 實驗 | 2007年級臨床專業(yè)1，9班 | 授課時間 | 08.10.27-08.10.31 | 學時 | 4 | |||
| 授課教師 | 吳明彩 | 專業(yè)技術職務 | 講師 | 教學班學生數(shù) | 30×3 | ||||
| 教學目的 及任務 | 掌握溫度、酸堿度、抑制劑和激活劑對酶促反應影響的機理。 | ||||||||
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實驗三 溫度、酸堿度、抑制劑和激活劑對酶促反應的影響 一. 講解部分 25分鐘 復習理論課相關內容（5分鐘)、介紹本次實驗原理（10分鐘)、實驗中的操作細節(jié)及其注意事項（10分鐘) 二. 學生實驗操作部分 135分鐘
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| 本單元重點 | 溫度、酸堿度、抑制劑和激活劑對酶促反應影響的機理。 | ||||||||
| 本單元難點 | 淀粉水解程度的控制 | ||||||||
| 教學方法及準備 | 板書講授+課堂演示；板書 | ||||||||
| 所用教材 | 《生物化學及分子生物學實驗教程》畢富勇主編 安徽科學技術出版社 | ||||||||
| 參考資料 | 《生物化學實驗原理和方法》 李建武等編 北京大學出版社 | ||||||||
| 教研室審閱意見 | |||||||||
（教案末頁)
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| 在一定溫度范圍內，溫度升高，酶促反應速度加快，反之降低。當溫度上升到某一定值時，酶活性最高，此溫度稱為該酶的最適溫度。高于此溫度，反應速度將會下降；過高溫度會使酶蛋白變性而失活。酶促反應對于環(huán)境酸堿度的變化非常敏感，能使酶發(fā)揮最大活性的溶液pH，稱為該酶的最適pH。環(huán)境pH的升高或降低都會降低酶的活力。酶的活性可受某些物質的影響，能夠使酶活性增強的物質，稱為酶的激活劑；能夠使酶活性降低的物質，稱為酶的抑制劑。 本實驗以唾液淀粉酶為例，在不同溫度或酸堿度下，檢測同一時間內淀粉水解的程度。通過淀粉與碘反應產生不同的顏色，可以了解溫度、pH、激活劑與抑制劑對酶促反應的影響。 | ||
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復習思考題 或 作 業(yè) 題 | 1.淀粉逐步水解的各級產物與碘液反應各呈現(xiàn)什么顏色 2. 溫度、酸堿度、抑制劑和激活劑對酶促反應影響的機理。 | ||
| 教 學 效 果 與 分 析 | 通過本次實驗，進一步鍛煉了學生的生化操作，并且使學生認識到定性實驗與定量實驗的區(qū)別，掌握溫度、酸堿度、抑制劑和激活劑對酶促反應影響的機理，加深了對酶促反應影響因素理論的理解。 |
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授課時間：2008.11.11-2008.11.15 教案完成時間：2008.11.8
| 授課名稱： | 生物化學 實驗 | 2007年級臨床專業(yè)1，9班 | 授課時間 | 2008.11.11-15 | 學時 | 4 | ||
| 授課教師 | 吳明彩 | 專業(yè)技術職務 | 講師 | 教學班學生數(shù) | 30×3 | |||
| 教學目的 及任務 | 掌握酮體生成和利用的基本過程，通過實驗掌握酮體在肝內生成和肝外利用。 | |||||||
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實驗五 酮體的生成與利用 一. 講解部分 25分鐘 復習理論課相關內容（5分鐘)、介紹本次實驗原理（10分鐘)、實驗中的注意事項（10分鐘) 二. 示教部分 5分鐘 示范小白鼠的處死方法（5分鐘)
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| 本單元重點 | 3. 掌握酮體生成的部位和關鍵酶 4. 掌握酮體利用的部位和肝不能利用酮體的原因 | |||||||
| 本單元難點 | 小白鼠處死及肝臟和肌肉的分離 | |||||||
| 教學方法及準備 | 板書講授+課堂演示；板書 | |||||||
| 所用教材 | 《生物化學及分子生物學實驗教程》畢富勇主編 安徽科學技術出版社 | |||||||
| 參考資料 | 《生物化學實驗原理和方法》 李建武等編 北京大學出版社 | |||||||
| 教研室審閱意見 | ||||||||
（教案末頁)
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| 酮體是乙酰輔酶A在肝內肝內代謝所產生的一種特有的中間代謝產物，肝內只能產生酮體不能利用酮體。本實驗主要是驗證這一理論。 本次實驗需要處死小白鼠，取肝臟和肌肉，因而著重強調實驗中對動物的處理方法，注意培養(yǎng)學生的動手能力。在實驗中讓學生進一步熟悉常用實驗儀器如刻度吸管、研缽、試管等的使用方法，糾正學生的不良操作習慣，培養(yǎng)學生對生化實驗的興趣。 | ||
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復習思考題 或 作 業(yè) 題 | 1酮體的概念和酮體生成的生理意義。 | ||
| 教 學 效 果 與 分 析 |
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授課時間：2006.10.22---2007.1.6 教案完成時間：2007.10.15
| 授課名稱： | 生化實驗 | 護理 06年級 臨床專業(yè)（本科)2班 | 授課時間 | 2007.6 | 學時 | 3 | |||
| 授課教師 | 李璐 | 專業(yè)技術職務 | 講師 | 教學班學生數(shù) | 30×3 | ||||
| 教學目的 及任務 | 1.了解并掌握酵母細胞RNA提取及地衣酚顯色反應 2.掌握離心機的使用 | ||||||||
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實驗六 酵母細胞核酸的提取和定量 一. 實驗原理 20min 二. 實驗步驟 20min 三. 儀器介紹（離心機等) 10min 四. 學生實驗操作部分 120min
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| 本單元重點 | 細胞RNA的提取 | ||||||||
| 本單元難點 | 地衣酚顯色反應原理 | ||||||||
| 教學方法及準備 | 板書講授+課堂演示；板書 | ||||||||
| 所用教材 | 《生物化學劑分子生物學實驗教程》安徽科技出版社 | ||||||||
| 參考資料 | |||||||||
| 教研室審閱意見 | |||||||||
（教案末頁)
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| 本次實驗是比較具有綜合性的一次實驗，這次實驗對以前講解的玻璃儀器的操作、分光光度計的原理和使用等做了復習，使學生對其有了更深刻的掌握。另外，本次實驗還首次介紹了離心機的使用。此次實驗是涉及核酸提取的實驗，因此可以看做普通生化實驗和分子生物學的銜接，可對學生以后的學習打下基礎。 | ||
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復習思考題 或 作 業(yè) 題 | 1.本次實驗提取核酸的主要原理是什么？ 2.地衣酚顯色的原理是什么？ | ||
| 教 學 效 果 與 分 析 | 通過實驗，學生掌握了基本的生物化學實驗的操作，能自己熟練操作分光光度計、離心機等一些常規(guī)儀器。掌握了核酸提取、地衣酚顯色等的原理和操作。 |
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授課時間：2007.10.22-2008.1.4 教案完成時間：2007.11.20
| 授課名稱： | 生物化學 實驗 | 2006年級臨床專業(yè)5，11,17班；2006年級法醫(yī)專業(yè)2班 | 授課時間 | 2007.12.3-14 | 學時 | 3 | |||
| 授課教師 | 張亞莉 | 專業(yè)技術職務 | 助教 | 教學班學生數(shù) | 30×4 | ||||
| 教學目的 及任務 | 掌握谷丙轉氨酶活力測定的原理及方法; 掌握醋酸纖維素薄膜電泳的操作方法; | ||||||||
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實驗 三 血清谷丙轉氨酶活力測定 血清蛋白的醋酸纖維素薄膜電泳 一. 講解部分 30分鐘 復習理論課相關內容（5分鐘)、介紹本次實驗原理（15分鐘)、實驗中的操作細節(jié)及其注意事項（10分鐘) 二.
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| 本單元重點 | 5. 對谷丙轉氨酶活力測定原理的理解 6. 醋酸纖維素薄膜電泳方法的掌握 | ||||||||
| 本單元難點 | 理解谷丙轉氨酶活力測定實驗中為什么第二次加入底物 | ||||||||
| 教學方法及準備 | 板書講授+課堂演示； | ||||||||
| 所用教材 | 《生物化學及分子生物學實驗教程》畢富勇主編 安徽科學技術出版社 | ||||||||
| 參考資料 | 《生物化學實驗原理和方法》 李建武等編 北京大學出版社 | ||||||||
| 教研室審閱意見 | |||||||||
（教案末頁)
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| 本次實驗有兩個小實驗組成。第一個實驗谷丙轉氨酶(GTP)活力的測定，通過用標準曲線法求得一定時間內在GTP的催化下，產物的生成量來完成。標準曲線法同學在第二次實驗中已經掌握，本次重點放在對實驗方案的特殊設計上。第二個實驗醋酸纖維素薄膜電泳分離血清中的蛋白，鑒于學生第一次接觸依靠電泳技術分離物質，對實驗原理及具體操作過程作重點介紹，并且對實驗重要環(huán)節(jié)做演示。 | ||
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復習思考題 或 作 業(yè) 題 | 1、復習谷丙轉氨酶催化的丙氨酸和酮戊二酸之間的轉氨基反應 2、復習電泳分離物質的原理 3、思考谷丙轉氨酶活力測定實驗中為什么第二次加入底物？ | ||
| 教 學 效 果 與 分 析 | 通過原理講解和實驗演示，并且在學生操作過程中及時指導，本次實驗取得良好結果。 |
皖南醫(yī)學院教案首頁
授課時間：2007.12.24~2008.1.11 教案完成時間：2007.12.22
| 授課名稱： | 分子生物學 | 2006年級藥學 | 授課時間 | 2007.12-24~28 | 學時 | 3 | |||
| 授課教師 | 孫玲玲 | 專業(yè)技術職務 | 副教授 | 教學班學生數(shù) | 30人 | ||||
| 教學目的 及任務 | 1.了解轉化的概念及其在分子生物學研究中的意義。 | ||||||||
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大腸桿菌感受態(tài)細胞制備及轉化（50分鐘*3)
一、講解（20分鐘) 實驗原理 1、 感受態(tài)細胞的概念 2、 轉化的概念及原理 3、 感受態(tài)細胞制備及轉化中的影響因 實驗操作及注意事項
二、學生操作（130分鐘) | |||||||||
| 本單元重點 | 氯化鈣法制備大腸桿菌感受態(tài)細胞的方法。 | ||||||||
| 本單元難點 | 防止雜菌和其它外源 DNA 的污染 | ||||||||
| 教學方法及準備 | 學生動手為主；教師講授為輔 | ||||||||
| 所用教材 | 畢富勇主編《生物化學及分子生物學實驗教程》安徽科技出版社 | ||||||||
| 參考資料 | 《分子生物學技術》《醫(yī)學細胞及分子生物學》 | ||||||||
| 教研室審閱意見 | |||||||||
（教案末頁)
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| 重組DNA分子體外構建完成后，必須導入特定的宿主（受體)細胞，使之無性繁殖并高效表達外源基因或直接改變其遺傳性狀，這個導入過程及操作統(tǒng)稱為重組DNA分子的轉化。所謂的感受態(tài)，即指受體（或者宿主)最易接受外源DNA片段并實現(xiàn)其轉化的一種生理狀態(tài)，它是由受體菌的遺傳性狀所決定的，同時也受菌齡、外界環(huán)境因子的影響。cAMP可以使感受態(tài)水平提高一萬倍，而Ca2 也可大大促進轉化的作用。細胞的感受態(tài)一般出現(xiàn)在對數(shù)生長期，新鮮幼嫩的細胞是制備感受態(tài)細胞和進行成功轉化的關鍵。大腸桿菌的轉化常用化學法（CaCl2法)，該法最先是由Cohen于1972年發(fā)現(xiàn)的。其原理是細菌處于0℃，CaCl2的低滲溶液中，菌細胞膨脹成球形，轉化混合物中的DNA形成抗DNase的羥基-鈣磷酸復合物粘附于細胞表面，經42℃短時間熱沖擊處理，促使細胞吸收DNA復合物，在豐富培養(yǎng)基上生長數(shù)小時后，球狀細胞復原并分裂增值，被轉化的細菌中，重組子中基因得到表達，在選擇性培養(yǎng)基平板上，可選出所需的轉化子。 | ||
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或 作 業(yè) 題 | 1. 影響轉化率的因素 2. 除化學法轉化細菌外，還有其他哪些常用轉化法， | ||
| 教 學 效 果 與 分 析 | 整個操作均需在冰上進行，不能離開冰浴，否則細胞轉化率將會降低。而學生人數(shù)比較多，條件限制，有些小組結果不容樂觀。 |
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授課時間：2008.11.18---2008.11.22 教案完成時間：2008.11.10
| 授課名稱： | 生物化學 實驗 | 2007年級臨床專業(yè)20班 | 授課時間 | 2008.11.18---2008.11.22 | 學時 | 4 | ||
| 授課教師 | 張玲 | 專業(yè)技術職務 | 助教 | 教學班學生數(shù) | 30 | |||
| 教學目的 及任務 | 掌握肝糖原合成和分解代謝的基本過程，通過實驗掌握食物對肝糖原含量的影響。 | |||||||
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實驗六 饑餓和飽食對肝糖原含量的影響 一. 講解部分 25分鐘 總結上次實驗及實驗報告中出現(xiàn)的問題（5分鐘)、復習理論課相關內容 （5分鐘)、介紹本次實驗原理（10分鐘)、實驗中的注意事項（5分鐘) 二. 示教部分 5分鐘 示范小白鼠的處死方法（5分鐘)
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| 本單元重點 | 7. 掌握動物實驗的特點 8. 掌握分光光度計的使用 | |||||||
| 本單元難點 | 小白鼠處死及肝臟的分離 | |||||||
| 教學方法及準備 | 板書講授+課堂演示；板書 | |||||||
| 所用教材 | 《生物化學及分子生物學實驗教程》畢富勇主編 安徽科學技術出版社 | |||||||
| 參考資料 | 《生物化學實驗原理和方法》 李建武等編 北京大學出版社 | |||||||
| 教研室審閱意見 | ||||||||
（教案末頁)
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| 上次實驗中，部分學生對分光光度法的原理理解不透徹，操作不熟練，這次實驗需再次強調分光光度計的原理及使用。本次實驗是動物實驗，因而著重強調實驗中對動物的處理方法，注意培養(yǎng)學生的動手能力。在實驗中讓學生進一步熟悉常用實驗儀器如刻度吸管、研缽、試管等的使用方法，糾正學生的不良操作習慣，培養(yǎng)學生對生化實驗的興趣。對動物的處理及分光光度計的使用是本次實驗的重點，要求學生能熟練掌握。 | ||
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復習思考題 或 作 業(yè) 題 | 1.肝糖原的含量受哪些因素的影響？ 2.饑餓和飽食狀態(tài)對肝糖原分別產生什么樣的影響，請解釋原因。 | ||
| 教 學 效 果 與 分 析 | 通過實驗，學生進一步熟悉了分光光度計的原理和使用方法，能自己熟練操作分光光度計。同時亦進一步熟悉了小白鼠的處死及肝臟分離方法，掌握了糖原含量測定的基本原理，加深了對理論課內容的理解。 |
皖南醫(yī)學院教案首頁
授課時間：2008.10.13---2008.10.17 教案完成時間：2008.10.10
| 授課名稱： | 生物化學 實驗 | 2007年級臨床專業(yè)20班 | 授課時間 | 08.10.13-08.10.17 | 學時 | 4 | |||
| 授課教師 | 張玲 | 專業(yè)技術職務 | 教學班學生數(shù) | 30 | |||||
| 教學目的 及任務 | 1.了解實驗室規(guī)章制度 2執(zhí)業(yè)護士網.掌握一些常用儀器的使用 3.掌握蛋白質含量測定的基本實驗原理和方法 | ||||||||
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實驗一 Lowry氏酚試劑比色法測蛋白質含量 一. 講解部分 35min 強調實驗室規(guī)章制度（5min)、常用儀器的使用（15min)、本次實驗原理（10min)、實驗中的注意事項（5min) 二. 學生實驗操作部分 125min
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| 本單元重點 | 9. 對比色法測物質含量原理的理解 10. 對分光光度計的使用 | ||||||||
| 本單元難點 | 分光光度計的原理和使用方法 | ||||||||
| 教學方法及準備 | 板書講授+課堂演示；板書 | ||||||||
| 所用教材 | 《生物化學及分子生物學實驗教程》畢富勇主編 安徽科學技術出版社 | ||||||||
| 參考資料 | 《生物化學實驗原理和方法》 李建武等編 北京大學出版社 | ||||||||
| 教研室審閱意見 | |||||||||
（教案末頁)
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| 本次實驗是生化第一次實驗，因而要強調整個階段的實驗室規(guī)章制度以及實驗報告的書寫和實驗課堂的紀律。對于常用實驗儀器，如吸管、容量瓶、試管等的使用，應盡量詳細講解，使學生打下基礎，以便后面的實驗操作的規(guī)范進行。分光光度計的原理和使用是本次實驗的重點，并也貫穿整個生化實驗的操作，所以要求學生能熟練掌握。 | ||
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復習思考題 或 作 業(yè) 題 | 1.比色法測物質含量時有幾種求解方法？ 2.Lowry酚試劑法測蛋白含量的原理。 | ||
| 教 學 效 果 與 分 析 | 通過實驗，學生以基本掌握了分光光度計的原理和使用方法，能自己熟練操作分光光度計。掌握了酚試劑法測蛋白含量的原理，加深了對蛋白質理論的理解。 |
皖南醫(yī)學院教案首頁
授課時間：2008.10.20-2008.10.24 教案完成時間：2008.10.18
| 授課名稱： | 生物化學 實驗 | 2007年級臨床專業(yè)1，9班 | 授課時間 | 10.20-10.24 | 學時 | 4 | |||
| 授課教師 | 吳明彩 | 專業(yè)技術職務 | 講師 | 教學班學生數(shù) | 30×3 | ||||
| 教學目的 及任務 | 掌握堿性磷酸酶的km值的測定方法，通過實驗掌握雙倒數(shù)作圖來計算出堿性磷酸酶的km值。 | ||||||||
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實驗二 堿性磷酸酶（AKP)的km值的測定 一. 講解部分 25分鐘 復習理論課相關內容（5分鐘)、介紹本次實驗原理（10分鐘)、實驗中的操作細節(jié)及其注意事項（10分鐘) 二.
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| 本單元重點 | 11. 對雙倒數(shù)作圖來計算出堿性磷酸酶的km值原理的理解 12. 掌握堿性磷酸酶的km值的測定方法 | ||||||||
| 本單元難點 | 用雙倒數(shù)作圖計算堿性磷酸酶的km值 | ||||||||
| 教學方法及準備 | 板書講授+課堂演示；板書 | ||||||||
| 所用教材 | 《生物化學及分子生物學實驗教程》畢富勇主編 安徽科學技術出版社 | ||||||||
| 參考資料 | 《生物化學實驗原理和方法》 李建武等編 北京大學出版社 | ||||||||
| 教研室審閱意見 | |||||||||
（教案末頁)
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| 米氏方程km值是酶促反應速度為最大反應速度一半時的底物濃度，是酶的特征性常數(shù)。用雙倒數(shù)作圖是求得某一酶的km值的常用方法。 本次實驗以AKP為例，測定其于不同底物濃度下的反應初速度，通過雙倒數(shù)作圖，測定并最終計算出酶的km值。因而著重強調實驗中對刻度吸管使用的準確性高，注意培養(yǎng)學生的動手和分析能力。在實驗中讓學生進一步熟悉常用實驗儀器如刻度吸管、試管等的使用方法，糾正學生的不良操作習慣，培養(yǎng)學生對生化實驗的興趣。 | ||
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復習思考題 或 作 業(yè) 題 | 1復習米氏方程的推導。 | ||
| 教 學 效 果 與 分 析 | 通過本次實驗，進一步鍛煉了學生的生化操作，并且使學生認識到定量實驗與定性實驗的區(qū)別，了解定量實驗對數(shù)據(jù)精確性的要求，在數(shù)據(jù)的處理上，使學生練習了作圖法求所需量的方法。 |
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α-酮戊二酸+丙氨酸