實驗十一 霍亂弧菌
霍亂弧菌(V.cholerae)可分為古典生物型和ElTor生物型;根據菌體抗原(O抗原)又可分為155個血清群,其中O1血清群和O139血清群是霍亂的病原菌,能引起霍亂的發(fā)病和流行。
形態(tài)與培養(yǎng)特性
m.gydjdsj.org.cn/wsj/【材料與方法】
1.霍亂弧菌革蘭染色片。
2.霍亂弧菌(水弧菌代)堿性蛋白胨水培養(yǎng)物。
3.霍亂弧菌于TCBS培養(yǎng)基上的分離培養(yǎng)物。
【結果】
1.霍亂弧菌為革蘭陰性菌,菌體彎曲呈弧形或逗點狀,平行排列似魚群狀。
2.以懸滴法觀察動力,細菌運動活潑,呈穿梭樣或流星狀。
3.霍亂弧菌在TCBS培養(yǎng)基上可形成較大、黃色的菌落。
附錄:
(一)熒光菌球試驗
【原理】
熒光菌球試驗是一種新型的免疫熒光快速診斷技術。其原理是在細菌培養(yǎng)液中加一定量熒光抗體,然后接種標本,若糞便中有相應的病原菌時,抗體即與之結合發(fā)生凝集,凝集后細菌并不死亡,在適宜溫度下仍能繼續(xù)繁殖而集合成團,在熒光顯微鏡下呈現一團絨球樣熒光,故稱熒光菌球。
【材料與方法】
1.將霍亂弧菌接種于含有一定量熒光抗體的堿性蛋白胨水中,37℃增菌6~8h。
2.挑取1環(huán)上述培養(yǎng)物于清潔玻片上,放上蓋玻片,在熒光顯微鏡下觀察。
【結果】
熒光球大而發(fā)亮呈圓球狀,結構較疏松,周圍近似卷m.gydjdsj.org.cn/pharm/發(fā)狀。隨孵育時間增長,菌球結構致密,周圍較圓,整齊,菌球周圍有刺毛,有的如銀絲般纏繞。孵育時間短時,菌球往往呈多形性。
(二)制動試驗
【原理】
霍亂弧菌在液體培養(yǎng)基中可見流星似的運動,若在培養(yǎng)液內加人霍亂免疫血清,則霍亂弧菌凝集,運動停止,稱為制動試驗?捎糜诨魜y弧菌的快速早期診斷。
【材料與方法】
1.取病人水樣便6h蛋白胨培養(yǎng)液0.25ml,加適量稀釋的霍亂免疫血清0.25ml,混勻。
2.取上述樣品0.25ml,加0.25ml生理鹽水混勻,作為對照。
3.置37℃5min,觀察結果。
【結果】
凡凝成小塊,動力消失者為陽性,反之為陰性。