新購人的血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀都需要進(jìn)行校正， 但是有些儀器在出廠前已為用戶校正完畢，用戶在使用標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行測(cè)定時(shí)，得到的數(shù)值均在允許范圍以內(nèi)，一些早期生產(chǎn)的血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，如CO ULTREZF型等，在使用前應(yīng)作閾值選擇， 以分別確定該儀器做白細(xì)胞和紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的最佳閾值。一些新型的血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀則可通過校正系數(shù)或調(diào)整計(jì)數(shù)時(shí)間等方法完成校正工作。
1．閾值的選擇
最初的電子血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀不僅計(jì)數(shù)人血細(xì)胞，也可以計(jì)數(shù)其他細(xì)胞和顆粒，所以也稱粒子計(jì)數(shù)器。因所計(jì)數(shù)的各種粒子，包括紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板的體積大小相差不一，所以應(yīng)分別選擇出計(jì)數(shù)各種粒子的最佳閾值。
計(jì)數(shù)人血細(xì)胞的最佳閾值選擇。按儀器要求的稀釋倍數(shù)稀釋血標(biāo)本，為消除稀釋誤差可一次性稀釋成50 ml 樣品。測(cè)白細(xì)胞應(yīng)先加入溶血?jiǎng)�，將�?biāo)本放于計(jì)數(shù)樣品臺(tái)上，從閾值選擇“1”開始，在每個(gè)閾值點(diǎn)上計(jì)數(shù)數(shù)次，記錄每個(gè)閾值點(diǎn)上的計(jì)數(shù)值或均值。以細(xì)胞數(shù)為縱坐標(biāo)，以閾值點(diǎn)為橫坐標(biāo)，畫一曲線。如曲線中平坦部分太寬，則表示儀器不太敏感，曲線中平坦部分太窄則儀器工作重復(fù)性不好，誤差大。應(yīng)找出曲線平坦部位較為適中的曲線中間點(diǎn)或中間點(diǎn)偏低一側(cè)的閾值點(diǎn)作為該項(xiàng)細(xì)胞計(jì)數(shù)的最佳工作點(diǎn)。閾值設(shè)置太高，會(huì)使體積較小的細(xì)胞不被計(jì)入，閾值設(shè)置太低則會(huì)使體積更小的顆粒、細(xì)胞碎片和儀器電子噪音誤作細(xì)胞而被計(jì)入，使得結(jié)果偏高。因此儀器選定閾值對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性是很重要的，該類型儀器以每半年重復(fù)校正1 次閾值為好。新型的血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀多數(shù)已由廠家按計(jì)數(shù)人血細(xì)胞的標(biāo)準(zhǔn)選擇好了閾值的上下限，不需使用者更改。
2．校準(zhǔn)物校正法
許多國外儀器生產(chǎn)廠家為自己的儀器準(zhǔn)備了商品校準(zhǔn)物，如4C－PLUS、S－CAL、HEAMA－QC等。這種商品校準(zhǔn)物一般包含8～10 余項(xiàng)參數(shù)的平均值和范圍，并有高、正常、低三種不同的濃度，有效期一般為3個(gè)月左右。國內(nèi)目前有各檢驗(yàn)中心制備的標(biāo)準(zhǔn)血紅蛋白和白細(xì)胞等3～4 種質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)物。使用校準(zhǔn)物時(shí)應(yīng)將標(biāo)本按要求進(jìn)行稀釋，每個(gè)指標(biāo)應(yīng)做5個(gè)稀釋，測(cè)定5 次，每個(gè)參數(shù)的CV＜3％，求出每個(gè)參數(shù)的均值，它們應(yīng)在校準(zhǔn)物給定的范圍以內(nèi)。如不在該給定范圍之內(nèi)，首先應(yīng)仔細(xì)查找原因， 包括試劑、電壓、稀釋、操作、校準(zhǔn)物本身等，一切外源性因素排除之后，要在有經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員仔細(xì)閱讀說明書后，才可考慮調(diào)整儀器的校正機(jī)關(guān)。
3．使用參考儀器校正法
取一份或幾份不同濃度的新鮮EDTA 抗凝血，選定一臺(tái)經(jīng)過校正的血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀作為參考儀器，用該參考儀器對(duì)該份E DT A 抗凝血進(jìn)行定值， 每項(xiàng)指標(biāo)至少測(cè)定10 次，求其平均值和95％的可信限范圍（CV＜3％)。以各項(xiàng)目的平均值做為標(biāo)準(zhǔn)， 按校準(zhǔn)物校正來校正新購人的儀器。此方法雖易于開展，但所選擇的參考儀器必須嚴(yán)格掌握。如本單位無合格的儀器，選用本市或本地區(qū)的經(jīng)過校正的儀器，或經(jīng)本地區(qū)及上級(jí)臨床檢驗(yàn)中心多次質(zhì)控考核合格的儀器作為參考儀器。此外，也可采用顯微鏡下計(jì)數(shù)的方法，分光光度計(jì)法，溫氏離心法來分別測(cè)定紅白細(xì)胞，血紅蛋白和紅細(xì)胞比容。要求經(jīng)驗(yàn)豐富的技術(shù)人員在最佳條件下反復(fù)測(cè)定多次，得到各項(xiàng)目的參考值范圍。但是由于方法學(xué)上的差異，不易得到一個(gè)穩(wěn)定的，精密度良好的參考值。故不推薦用顯微鏡計(jì)數(shù)法來校正電子血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀。
